血液脳関門を介したミクログリアの脳内移行に関与する分子の同定

鉴定参与小胶质细胞通过血脑屏障迁移到大脑的分子

• 批准号: 17659026
• 负责人: 駒野 宏人
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Iwate Medical University (2007)National Institute for Longevity Sciences,NCGG (2005-2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659026/
• 关键词: ミクログリア; 血液脳関門

本研究は、ミクログリアの持つ血液脳関門(BBB:blood-brain barder)通過機能に関与する分子を同定し、その実態を明らかにすることである。作年度は、マウス由来株化ミクログリアRa2[澤田(名古屋大学)により樹立]よりレトロウイルスベクターとするcDNAライブラリーを作成した。本年度は、トランスマイグレイションアッセイ(平成17年度確立)を用いて、作成したcDNAライブラリーより、ミクログリアの血液脳関門通過機能に関与する分子のスクリーニングを実施した。まず、BBBを構成している内皮細胞株(MBEC4細胞:Drug Metab.Phamacokin.19:270、2004)をトランスウェルの上部チャンバーのメンベレン上、(孔サイズ:3μM)に3日間培養し、上部と下部チャンバーとの抵抗値がほぼ200Ωになることを確認した。その後、cDNAで感染させたRa2(全細胞数5X10^6細胞、1ウェルあたり4x10^4細胞)を上部チャンバーに培養した。さらに培養3日後、下部チャンバーに移行したRa2を数えた。その結果、下部チャンバーに移行したRa2細胞数は、cDNAライブラリー感染依存に高いウェルも存在したが、現在、正確に、それに関与する分子の同定にまでは至らなかった。これは、スクリーニングの培養時間が長く、その間、MBEC4細胞が部分的に破損し、ベクター感染Ra2細胞(background)においても、下部チャンバーに移行する細胞数が多数認められたため、関与する分子の同定を困難にしていると考えられた。現在、培養時間を短縮するためのスクリーニング条件をより詳細に検討を進めている。

は, this study ミ ク ロ グ リ ア の hold つ blood 脳 masato door (BBB: blood - brain barder) by functional に masato and す を る molecules with し, そ の state be を Ming ら か に す る こ と で あ る. Make annual は, マ ウ ス origin plants turn ミ ク ロ グ リ ア in Ra2 [ze tian (Nagoya university) に よ り set] よ り レ ト ロ ウ イ ル ス ベ ク タ ー と す る cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を made し た. This year は, ト ラ ン ス マ イ グ レ イ シ ョ ン ア ッ セ イ (pp.47-53 17 year established) を い て, consummate し た cDNA ラ イ ブ ラ リ ー よ り, ミ ク ロ グ リ ア の blood 脳 masato door by function に masato and す る molecular の ス ク リ ー ニ ン グ を be applied し た. Youdaoplaceholder0 and BBBを constitute the <s:1> て る る る endothelial cell line (MBEC4 cells :Drug) Metab. Phamacokin. 0, 2004) を ト ラ ン ス ウ ェ ル の upper チ ャ ン バ ー の メ ン ベ レ ン, (hole サ イ ズ : 3 microns) に 3 day training し, upper と lower チ ャ ン バ ー と の resistance numerical が ほ ぼ 200 Ω に な る こ と を confirm し た. After そ の, cDNA で infection さ せ た in Ra2 (whole cell number 5 x10 ^ 6 cells, 1 ウ ェ ル あ た り 4 x10 ^ 4 cells) upper を チ ャ ン バ ー に cultivate し た. After 3 days of さらに culture, the lower part チャ バ バ さらに に に transfer <s:1> たRa2を number えた. そ の results, lower チ ャ ン バ ー に transitional し た cells in Ra2 number は, cDNA ラ イ ブ ラ リ ー high infection dependent に い ウ ェ ル も exist し た が, now, correct に, そ れ に masato and す の る molecules with fixed に ま で は to ら な か っ た. こ れ は, ス ク リ ー ニ ン グ の が long く, そ の between cells, MBEC4 が に damaged し, ベ ク タ ー infection in Ra2 cells (background) に お い て も, lower チ ャ ン バ ー に transitional す る cell number が most recognize め ら れ た た め, masato and す の る molecules with fixed を difficult に し て い る と exam え ら れ た. Shortening of the time now, cultivating を す る た め の ス ク リ ー ニ ン グ conditions を よ り detailed に beg を 検 into め て い る.

项目成果

Homocysteine-induced endoplasmic reticulum protein (Herp) is up-regulated in sporadic inclusion-body myositis and in endoplasmic reticulumn stress-induced cultured human muscle fibers

同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白 (Herp) 在散发性包涵体肌炎和内质网应激诱导的培养人肌纤维中上调

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Neurochem. 96
• 作者: Nogalska A.;et al.
• 通讯作者: et al.

Characterization of APH-1 mutants with a disrupted transmembrane GxxxG motif

具有破坏的跨膜 GxxxG 基序的 APH-1 突变体的表征

• 发表时间: 2006
• 期刊: J. Mol. Neurosci 29
• 作者: Araki W.;et al.
• 通讯作者: et al.

Random mutagenesisi of Presenilin 1 identifies novel mutants exclusively generating longer Amyloid β peptides

Presenilin 1 的随机诱变鉴定出专门产生更长淀粉样蛋白 β 肽的新型突变体

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biol.Chem. 280
• 作者: Nakaya Y.;et al.
• 通讯作者: et al.

Angiotensin-converting enzyme converts Aβ1-42 to Aβ1-40 and its inhibition enhances brain Aβ deposition.

血管紧张素转换酶将 Aβ1-42 转化为 Aβ1-40，其抑制作用可增强大脑 Aβ 沉积。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Neurosci. 27
• 作者: Zou K;(Yanagisawa K) et al,
• 通讯作者: (Yanagisawa K) et al,

Reconstitution of γ‐secretase by truncated presenilin (PS) fragments revealed that PS C‐terminal transmembrane domain is critical for formation of γ‐secretase complex

通过截短的早老素 (PS) 片段重建 γ 分泌酶表明，PS C 端跨膜结构域对于 γ 分泌酶复合物的形成至关重要

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2005.00914.x
• 发表时间: 2005
• 期刊: Genes to Cells
• 影响因子: 2.1
• 作者: H. Shiraishi;Toshihiro Marutani;Hua;Y. Maeda;Y. Kurono;A. Takashima;W. Araki;M. Nishimura;K. Yanagisawa;H. Komano
• 通讯作者: H. Komano