Brugada症候群の分子病理

Brugada 综合征的分子病理学

• 批准号: 17659224
• 负责人: 苅部 明彦
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659224/
• 关键词: Brugada症候群; 特発性心室細動; 心筋Naチャンネル; siRNA

マウス心筋Naチャンネル遺伝子Scn5a特異的siRNAベクター機能の検討平成17年度に作成した3種のマウス心筋Naチャンネルαサブユニット遺伝子Scn5a特異的siRNAベクター(ベクターA,B,C)をマウス新生児単離心筋初代培養細胞に導入しベクターの効果を更に検討した。最も抑制効果の高いベクターAをマウス新生児単離心筋初代培養細胞に導入し、Immunoblottingならびに免疫染色、ホールセルパッチクランプ電気生理特性の解析を行った。Immunoblottingによる判定量的心筋Naチャンネルαサブユニットの発現量を検討したところコントロールに比してベクターBでは約21%の蛋白発現が認められた。免疫染色では心筋Naチャンネルαサブユニットは細胞端の接合部位での発現低下も認められた。ホールセルパッチクランプによる電気生理学的解析ではNa電流の大幅な減少が認められ、膜電位の持続時間の短縮が認められた。Scn5a特異的siRNAトランスジェニックマウスの作成上記のマウス心筋Naチャンネルαサブユニット遺伝子Scn5a特異的siRNAベクターのうち最も阻害効果の高いベクターBをマイクロインジェクションによりマウス受精卵に導入し、胚形成後に偽妊娠マウスに戻し、トランスジェニックマウスの作成を試みた。しかしながらこれら受精卵からは初代トランスジェニックマウスの出生は認められなかった。妊娠初期にて死産となっており胎児発育の障害が認められた。死亡胎児マウスの心臓は低形成であり、それが発育障害の原因のひとつと考えられた。この死亡胎児マウスの心臓のImmunoblottingからは心筋Naチャンネルαサブユニットの発現低下を認めた。免疫染色では房室結節以下の刺激伝導系細胞での心筋Naチャンネルαサブユニットの発現低下を認めた。

In 2017, three kinds of siRNA (A,B,C) specific for Scn5a were created and introduced into neonatal centrifuge primary culture cells. Analysis of electrophysiological properties of the most inhibitory effect, i.e., immunostaining and immunostaining, in primary culture cells of newborn tendons. Immunoblotting is the determination of the amount of protein production in the heart of the brain, which is about 21% of the protein production in the brain. Immunostaining is used to detect low levels of DNA in the joint sites of the cell terminals. The analysis of electrophysiology shows that the Na current is greatly reduced and the duration of membrane potential is shortened. Scn5a-specific siRNAs are prepared from the above mentioned siRNAs. The siRNAs can be used to prevent the most harmful effects. The siRNAs are introduced into fertilized eggs and pseudo-pregnancy after embryo formation. The first generation of the sperm is the first generation of the sperm. Early pregnancy stillbirth and fetal development disorders are recognized. The cause of fetal mortality is low. The death of the fetus, the heart of the immune system, the heart of the body, the heart of the body. Immunostaining revealed a decrease in the presence of cardiac muscle Naンale α ket in stimulatory cells below the atrioventricular node.