マウス・ヒト胎盤由来間質細胞を用いた心血管再生医療に関する研究

利用小鼠和人胎盘来源的基质细胞进行心血管再生医学的研究

• 批准号: 17659235
• 负责人: 小田 洋平
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659235/
• 关键词: 心臓; 胎盤; 遺伝子治療; 細胞治療; 再生医学

(背景)我々は、難治性の心不全や先天性心疾患に対する心血管再生医療を臨床応用可能なレベルまで発展展開することを最終目標に、これまで細胞治療や遺伝子治療に関する基礎的研究をすすめてきた。特に再生治療に用いられる幹細胞・前駆細胞の供給源として倫理上の問題が極めて小さいと考えられる胎盤に着目し、従来最終分化を完了し高度に専門化した細胞であると考えられていた胎盤に、様々な臓器を構成する細胞に分化する能力を有する幹細胞・前駆細胞が含まれることを発見証明し特許を得た(2003-235549)。(目的)その成果をもとに本萌芽研究では以下の2点について研究した。1.マウス・ヒト胎盤に多能性体性幹細胞・前駆細胞が存在することを明らかにし、得られた細胞の特性を明らかにするとともに心筋や血管に分化することを心筋障害モデルで証明すること。2.細胞移植の効率を高めるためマイクロバブルと超音波照射を組み合わせたソノポレーション法が細胞治療に有用であるか否かを検討すること。(結果及び実績)1.GFP発現胎盤の心筋梗塞作成マウスやSCIDマウスへの移植実験で、血管系細胞へ分化する単核球細胞集団を分離精製したが、心筋細胞への分化については確認されていない(未発表)。現在さらにFACSで間質系細胞の表面マーカー検索や培養条件を検討中である。2.胎盤由来間質細胞の静脈血管内投与(ハイドロダイナミクス法も併用)では、心筋にドナー細胞を同定することは困難であったが心室内投与でわずかに血管系細胞の発現を認めた。現在ソノポレーション法の併用による細胞導入効率や生着率を検討中である。3.マイクロバブルを用いたソノポレーション法でマウス心筋や冠状動脈血管にプラスミドやSi-RNAを効率よく発現させることに成功した(研究成果の一部はBBRC2005に発表)。4.心血管再生医療を臨床応用可能なレベルまで発展展開する目的で、ビーグル犬を用いて、経カテーテル的に冠状動脈や冠静脈洞から胎盤由来間質細胞やプラスミドを心筋に発現導入する実験をおこなった。経胸壁電気ショック法を併用することにより、特に病的な心筋障害や合併症を生じることなく有意に効率よくプラスミドを心筋に導入することが可能であった(研究の一部はGene Therapy 2006に発表)。

(background) I 々 は congenital heart disease, incomplete refractory の heart や に す seaborne る cardiovascular regenerative medical を clinical 応 may use な レ ベ ル ま で 発 exhibition launched す る こ と を ultimate goal に, こ れ ま で cells treatment や but 伝 son に masato す る based research を す す め て き た. に に regenerative therapy used い ら れ る source of stem cells, former 駆 の supply と し て ethical の solution が め て small さ い と exam え ら れ る placenta に し, 従 to eventually finished differentiation を し highly に 専 door turn し た cells で あ る と exam え ら れ て い た placenta に, others 々 な viscera を constitute す る cells に す る を power す る stem cells, former 駆 が Including まれる,, とを, issued a certificate of authorization, を, た(2003-235549). (Objective)そ そ Achievements を そ とに とに this budding study で で the following two points に て て て て research た た 1. マ ウ ス · ヒ ト placenta に pluripotent stem cells, former 駆 が body sex exist す る こ と を Ming ら か に し, ら れ の た cells を Ming ら か に す る と と も に heart muscle や vascular に differentiation す る こ と を heart muscle handicap of モ デ ル で prove す る こ と. 2. Cell transplantation の sharper rate high を め る た め マ イ ク ロ バ ブ ル と ultrasound irradiation を group み close わ せ た ソ ノ ポ レ ー シ ョ ン method が cell therapy に useful で あ る か no か を beg す 検 る こ と. (results and び be grade) 1. The GFP 発 now placenta の heart muscle infarction made マ ウ ス や SCID マ ウ ス へ の transplant be 験 で, vascular cells へ す る 単 bulge cells sets 団 を separation of refined し た が, heart muscle cells へ の differentiation に つ い て は confirm さ れ て い な い (not 発 table). Now, the や culture conditions を検 on the surface of さらにFACSで interstitial cells 検 are discussed. 2. Origin placenta mesenchymal cells の cast with venous blood tube (ハ イ ド ロ ダ イ ナ ミ ク ス も and) で は, heart muscle に ド ナ を ー cells might be す る こ と は difficult で あ っ た が heart interior shots and で わ ず か に vascular cell の 発 を now recognize め た. Now, the ソノポレ, ソノポレ, ショ, ショ method is used and the による cell introduction efficiency や survival rate を検 is applied to である. 3. マ イ ク ロ バ ブ ル を with い た ソ ノ ポ レ ー シ ョ ン method で マ ウ ス heart muscle や coronary arteries に プ ラ ス ミ ド や Si - RNA を sharper rate よ く 発 now さ せ る こ と に successful し た (research の a は BBRC2005 に 発 table). 4. Cardiovascular regenerative medical を clinical 応 may use な レ ベ ル ま で 発 exhibition launched す る purpose で, ビ ー グ ル dog を with い て, 経 カ テ ー テ ル に of coronary artery や coronary vein cave か ら placental origin mesenchymal cells や プ ラ ス ミ ド を heart muscle に 発 now import す る be 験 を お こ な っ た. を 経 chest wall electric 気 シ ョ ッ ク method using す る こ と に よ り な heart muscle, special に disease handicap of や complications を raw じ る こ と な く intentionally に sharper rate よ く プ ラ ス ミ ド を heart muscle に import す る こ と が may で あ っ た (research の a は Gene Therapy 2006 に 発 table).

项目成果

Transthoracic direct current (DC) shock facilitates intramyocardial transfection of naked plasmid DNA infused via coronary circulation in canines.

经胸直流 (DC) 电击有助于通过冠状循环注入犬科动物的心肌内转染裸露质粒 DNA。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Gene Therapy (In press)
• 作者: Iida Y;et al.
• 通讯作者: et al.

Sonoporation using microbubble BR14 promotes pDNA/siRNA transduction to murine heart

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.08.052
• 发表时间: 2005-10-14
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Tsunoda, S;Mazda, O;Yoshikawa, T
• 通讯作者: Yoshikawa, T

Continuous thrombus in the right and left atria penetrating the patent foramen ovals.

右心房和左心房的连续血栓穿透未闭卵圆孔。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Circulation 112
• 作者: Fukumoto A;et al.
• 通讯作者: et al.

Clinical characteristics and morphologic features of isolated noncompaction of the ventricular myocardium: electrocardiogram-gated magnetic resonance imaging can elucidate more accurate biventricular structures

• DOI: 10.1007/s00380-004-0803-7
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: HEART AND VESSELS
• 影响因子: 1.5
• 作者: Oda, Y;Tsunoda, S;Matsubara, H
• 通讯作者: Matsubara, H