心筋/非心筋融合細胞を用いた心筋誘導因子の探究

使用心肌/非心肌融合细胞探索心肌诱导因子

• 批准号: 17659226
• 负责人: 永井 敏雄
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659226/
• 关键词: 形質変換; リプログラミング; 循環器

これまでに、骨格筋培養細胞、骨髄間葉系細胞、ヒト内皮前駆細胞、ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)、ヒト冠動脈平滑筋細胞株、心筋線維芽細胞のうち、HUVEC高頻度に融合細胞を形成して心筋細胞の形質を獲得すること、ラット心筋細胞とHUVECの融合細胞では、ヒト特異的心筋トロポニンIの発現を認め、また、ヒト特異的GATA4、CSX/Nkx2.5遺伝子発現を認めた。したがって、心筋細胞には通常は発現が抑制されている内皮細胞のGATA4、CSX/Nkx2.5遺伝子発現を活性化させる因子が存在することが明らかになった。本年度は、染色体のクロマチンのリモデリングを惹起して、遺伝子発現を制御するDNA脱メチル化剤やヒストン脱アセチル化酵素阻害剤をHUVECに作用させた後にラット心筋細胞と共培養し、内皮細胞には通常発現が抑制されている心筋細胞の遺伝子、蛋白発現が亢進するか検討した。その結果、HUVECを5μMの5-Azacytidineで処理すると、心筋細胞との共培養による細胞融合後に、ヒト特異的心筋収縮蛋白の発現が亢進することが明らかになった。このことは、非心筋細胞の心筋特異的遺伝子または心筋マスター遺伝子は、DNAメチル化によりその発現が制御されている可能性が示唆された。また、ナトリウム心房利尿性ペプチドまたはSERCAのレポーター遺伝子を発現させたCOS細胞およびHUVECを作成し、ヒト心筋cDNAラブラリーを遺伝子導入して、ナトリウム心房利尿性ペプチドまたはSERCAの遺伝子発現を指標にexpression cloningを行ったが、ヒト心筋cDNAラブラリーからは非心筋細胞に心筋細胞の遺伝子を発現させるcDNAは同定できなかった。

Cultured tendon cells, mesenchymal stem cells, endothelial progenitor cells, umbilical vein endothelial cells (HUVEC), coronary artery smooth tendon cell lines, vascular bud cells, HUVEC fusion cells with high frequency, formation of tendon cells, morphological acquisition of tendon cells, fusion of HUVEC cells, recognition of specific tendon I, identification of specific GATA4, CSX/Nkx2.5 is now available. The expression of GATA4 and CSX/Nkx2.5 genes in endothelial cells is usually inhibited by the presence of factors that activate them. This year, we have discussed the inhibition of DNA fragmentation and enzyme inhibition of chromosome fragmentation and gene expression, and the inhibition of gene and protein expression in endothelial cells after co-culture with HUVEC. Results: HUVEC treated with 5μM 5-Azacytidine, cardiac muscle cells co-cultured with 5 μ M 5-Azacytidine, and the expression of specific cardiac contractile protein increased after cell fusion. The possibility of the development of non-cardiac muscle cells and cardiac muscle specific genes is indicated. Atrial diuretic gene expression in COS cells and HUVEC cells was developed by cDNA sequencing and cDNA sequencing in non-cardiac muscle cells.

项目成果

Phosphatidylinositol 3-kinase-Akt pathway plays a critical role in early cardiomyogenesis by regulating canonical Wnt signaling

• DOI: 10.1161/01.res.0000175241.92285.f8
• 发表时间: 2005-07-22
• 期刊: CIRCULATION RESEARCH
• 影响因子: 20.1
• 作者: Naito, AT;Akazawa, H;Komuro, I
• 通讯作者: Komuro, I

Cardiac side population cells have a potential to migrate and differentiate into cardiomyocytes in vitro and in vivo.

心脏侧种群细胞有可能在体外和体内迁移并分化为心肌细胞。

• DOI: 10.1083/jcb.200603014
• 发表时间: 2007-01-29
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Oyama T;Nagai T;Wada H;Naito AT;Matsuura K;Iwanaga K;Takahashi T;Goto M;Mikami Y;Yasuda N;Akazawa H;Uezumi A;Takeda S;Komuro I
• 通讯作者: Komuro I