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細胞内サイトカイン染色法を用いた肺移植レシピエント免疫監視システム開発の可能性

使用细胞内细胞因子染色方法开发肺移植受者免疫监视系统的可能性

基本信息

批准号：
17659424
负责人：
岡田克典
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659424/
关键词：
肺移植拒絶反応モニタリングサイトカイン染色

项目摘要

本研究は、末梢血Tリンパ球を用いた細胞内サイトカイン染色(intracellular cytokine staining,以下-CS)法が、肺移植レシピエントの免疫監視法として有用か否かを、ラット肺移植モデルを用いて検索しようとするものである。ICS法は、ある抗原に特異的に反応して炎症性サイトカインを産生するTリンパ球を、フローサイトメトリーを用いて定量的に(総細胞数に対する割合として)測定する免疫学的手法である。BNラットをドナー、LewラットをレシピエントとしたMHC不適合の組み合わせで同所性左片肺移植を行った。移植肺にリンパ球の浸潤が起こり始める移植後3日目にレシピエントの大動脈より採血し、比重遠心法にてリンパ球を分離後、抗CD4抗体で標識した。これらリンパ球に膜透過処理をほどこした後、抗TNFα抗体を用いて細胞内サイトカイン染色を行い、フローサイトメトリーを用いてCD4陽性細胞中のTNFα陽性細胞の割合(TNFα/CD4)を測定した。この結果、上記MHC不適合の組み合わせの肺移植モデルにおいては、THFα/CD4は60.5%であり、コントロールとして用いた同系肺移植モデル(Lew→Lew)の31.4%、無処置Lewラットの18.0%と比較し、有意にTNFα陽性細胞の割合が上昇していた。このことから、レシピエント末梢血を用いたTNFαに対するICSが、比較的早期に移植肺拒絶反応を感知できる可能性が示唆された。

In this study, peripheral blood T cells were stained with intracellular cytokine staining (- CS), lung transplant recipients were tested by immunoassay, and lung transplant recipients were treated with lung transplantation. The immunological techniques were determined by ICS method, anti-inflammatory method and immunological method. BN, Lew, Lew, lung transplantation, lung transplantation and lung transplantation. Three days after transplantation, the lungs were immersed in the lungs, and the anti-CD4 antibodies were identified 3 days after the transplantation. After passing through the membrane, the anti-TNF-α antibody was stained with intracellular enzyme assay, and the anti-TNF-α antibody was determined by TNF-α