ヒト頸椎椎間板変性に関与するタンパク質発現動態のプロテオーム解析

人类颈椎间盘退变相关蛋白表达动态的蛋白质组学分析

• 批准号: 17659465
• 负责人: 小久保 安朗
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: University of Fukui
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659465/
• 关键词: 椎間癌変性; プロテオーム; タンパク質; 椎間板変性

頚椎前方除圧固定術の際に摘出した頚椎椎間板ヘルニア6椎間板と頚椎症6椎間板及び新鮮屍体正常頚椎から摘出した6椎間板についてサンプル調整を行った後、CyDye DIGE fluor minimal dyes (GE)によりラベリングを行い、固定化pH勾配等電点電気泳動、SDS-PAGE (sodiumdodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)を行った。次に、可視化された椎間板内に存在する全タンパクの検出をTyphoon 9400でスキャニングし、スポット検出を行った。新鮮屍体にのみ発現しているスポット3カ所と変性椎間板にのみ発現しているスポット3カ所を切り出し、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析装置を用いて質量分析及びアミノ酸配列の解析を行った。その結果、新鮮屍体椎間板組織のみに発現していたタンパクはhCGである可能性が示唆され、変性椎間板組織にのみ発現していたタンパクはannexin A8,apolipoprotein A-1及びlipoproteinである可能性があることが示唆された。これらタンパクの椎間板組織における働きは不明であるが、変性椎間板で欠如しているhCGは椎間板組織の恒常性の維持に必要なタンパクであり、annexin A8は椎間板組織変性の過程で椎間板組織の修復に関わるタンパクである可能性が考えられた。

After the anterior vertebral compression fixation was performed, CyDye DIGE fluorescent dyes (GE) were extracted, pH immobilized isoelectric point electrophoresis, SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis) was performed. Second, visualization of the presence of all the elements in the intervertebral disc Typhoon 9400. Fresh cadavers are used for mass analysis and acid alignment analysis of all kinds of intervertebral discs. The results showed that the possibility of discovery of annexin A8, apoprotein A-1 and lipoprotein in intervertebral disc tissue of fresh cadaver was higher than that of normal cadaver. It is necessary to maintain the constancy of intervertebral plate tissue. The process of intervertebral plate tissue variation is related to the possibility of intervertebral plate tissue repair.