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植物のアブシジン酸応答を制御する新規なタンパク質リン酸化酵素の機能解析

控制植物脱落酸反应的新型蛋白激酶的功能分析

基本信息

批准号：
21J10962
负责人：
神山佳明
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Tokyo University of Agriculture and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度までに、①グループCに属するRaf型プロテインキナーゼのRaf36が温和環境条件下で植物の生長促進に寄与する一方でABAシグナル伝達などのストレス応答には抑制的に作用すること、②Raf36はストレス条件下において活性化したSnRK2プロテインキナーゼにリン酸化されることで分解誘導されること、を明らかにした。これらの結果から、Raf36は主に温和環境条件において標的タンパク質のリン酸化制御を行うことで植物の生長促進に寄与するモデルが想定された。したがって、本年度はRaf36の下流で制御されるリン酸化シグナル伝達経路を明らかにするために、シロイヌナズナRaf36欠損変異体（raf36-1, raf36-2）を用いた比較リン酸化プロテオーム解析を実施した。その結果、227種のリン酸化ペプチドが野生株よりもraf36変異体で有意に減少していた。また、Raf36タンパク質を免疫沈降（IP）した際の共沈産物を質量分析計（LC-MS/MS）に供試するIP-MS解析を実施することで、937個のタンパク質をRaf36の相互作用候補因子として同定した。これらの結果を組み合わせることで、17個のタンパク質をRaf36の直接的な標的基質の候補として得た。現在はそれら遺伝子欠損変異体の表現型解析を進めることで、Raf36依存的な植物生長の制御メカニズムに必要な新規シグナル伝達因子の単離を目指している。

Before the annual までに, (1) グループ C に genus する Raf type プロテインキナーゼの Raf36 が mild conditions で promote plant growth and のに send する side で ABA シグナル伝 da などのストレス応 answer には inhibitory effect of the にすること, (2) Raf36 はストレス conditions において activeness した SnRK2 プロテインキナーゼにリン acidification されることで decomposition induced されること, を Ming らかにした. これらの results から, Raf36 は main に mild environmental conditions において mark タンパク qualitative のリン acidification ride on をうことで promote plant growth and のに send するモデルが scenarios された. したがって, this year's は Raf36 の obscene で suppression されるリン acidification シグナル伝を Ming da 経 road らかにするために, シロイヌナズナ Raf36 owe loss - variants (Raf36 - Raf36-1, 2) を with いた compare リン acidification プロテオーム parsing を be applied した. Youdaoplaceholder0 そ results: 227 species of <s:1> リ <e:1> acidified ペプチドが wild strains よよ <s:1> raf36 variants で intentionally に reduced <s:1> てたたた. また, Raf36 タンパク qualitative を immune sink (IP) した interstate の total を shen product quality analysis meter (LC - MS/MS) were used にする IP - MS analytical を be applied することで, 937 のタンパク qualitative を Raf36 の alternate interaction factor として with fixed した. これらの results を group み close わせることで, 17 のタンパク qualitative を Raf36 の direct な target substrate の alternate としてた. Now はそれら heritage 伝 son owe loss - variant の phenotype parsing を into めることで, Raf36 dependent なの plant growth suppression メカニズムにな necessary new rules シグナル伝 of factor の単 from を refers している.