胆道閉鎖症に対する新しい治療法としての胆管細胞移植の研究

胆管细胞移植治疗胆道闭锁新方法的研究

• 批准号: 17659555
• 负责人: 安藤 久實
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659555/
• 关键词: 胆道閉鎖症; 胆管; 細胞培養; 移植; 胆管培養; 黄疸; 肝移植

【目的】胆道開鎖症の総胆管の内腔は肥厚し、肉眼的には閉塞しているが、肥厚線維化した胆管上皮細胞が増殖能を有するのか、また、正常な胆管上皮細胞と比べて変化していないかどうかについて検討した。【方法】胆道閉鎖症3例に対し、手術中に採取した肝外胆道索状物組織を採取後直ちにHanks液(pH7.2)に浮遊、洗浄して1mm以下の砕片とし、4型collagenでcoatingした35mm培養皿に静置して10%Nuserumを含んだDulbecco's modified Eagle medium(DMFM)とHamF-12mediumにepidermal growth factorとinsulin、forskolinを添加した培養液で、37℃に保たれたCO2インキュベーターでprimary cultureを行った。隔日に培養液を交換し、primary culture後20日目に胆管上皮細胞がコロニーを形成している部分のコラーゲンを切離して1型コラーゲンでcoatingした培養皿に単層培養した。継代後7日目にcytokeratin 7(CK7)抗体で免疫細胞化学染色を行い、CK7陽性細胞の形態を観察してコロニーが何個存在するかカウントした。【結果】全例から胆管上皮様の細胞が出現し、コロニーを形成した。コロニー数は3例に差はなく、400倍視野で平均1.2±0.07群であった。胆管上皮様の細胞はCK7抗体による免疫細胞染色で陽性となり、この細胞が胆管上皮であることが示された。また、継代した細胞は位相差顕微鏡による形態観察で胆管上皮細胞であった。【総括】1.胆道閉鎖症の肝外胆道索状物から胆管上皮細胞が培養でき、培養された上皮細胞は継代を3回繰り返した後も増殖能が保たれている正常細胞であった。2.培養した胆管上皮細胞はCK7陽性細胞であり、胆道閉鎖症は何らかの外因により胆管の構造が破壊されたものであると考えられた。

【 objective 】 disease of biliary tract unlock の 総 bile duct の lumen は hypertrophy し, naked eye に は occlusion し て い る が, thick line d し た bile duct epithelial cells が raised colonization can have す を る の か, ま た, normal な bile duct epithelial cells と than べ て variations change し て い な い か ど う か に つ い て beg し 検 た. 【 method 】 disease of biliary atresia 3 cases に し seaborne, surgical に adopt し た extrahepatic biliary cable material organization を take straight after ち に Hanks fluid (pH7.2) に plankton, incorporated し て below 1 mm の 砕 piece と し type, 4 collagen で coating し た 35 mm petri dishes に let stand し て 10% Nuserum を containing ん だ Dul becco's modified Eagle medium(DMFM)と hamf-12 mediumにepidermal growth Factor と insulin, forskolin を add し で た broth, 37 ℃ に bartender た れ た CO2 イ ン キ ュ ベ ー タ ー で primary culture line を っ た. Day を に the culture exchange し, primary culture 20 mesh に bile duct epithelial cells after が コ ロ ニ ー を form し て い る part の コ ラ ー ゲ ン を sundering し て type 1 コ ラ ー ゲ ン で coating し た petri dish に 単 layer cultivate し た. Mesh に 継 generation after 7 cytokeratin 7 (CK7) antibody で immunocytochemistry staining を い, CK7 positive cells の form を 観 examine し て コ ロ ニ ー が what a exist す る か カ ウ ン ト し た. 【 Result 】 In the entire case of <s:1> ら bile duct epithelial sample, <s:1> cells が appeared and コロニ ら を を formed た. The コロニ number of コロニ 3 cases に difference に なく, 400x field of view で average 1.2±0.07 groups であった. Others in bile duct epithelium cells の は CK7 antibody に よ る immune cells positive staining で と な り, こ の が bile duct epithelial cells で あ る こ と が shown さ れ た. Youdaoplaceholder0, 継 generation of <s:1> た cells また phase difference 顕 microscopy による morphology 観 examination で bile duct epithelial cells であった. 【 総 enclosed 】 1. Disease of biliary atresia の extrahepatic biliary cable material か ら bile duct epithelial cells が cultivate で き, cultivating さ れ た epithelial cells は 継 generation を 3 back Qiao り return し た も raised after colonization can が bartender た れ て い る normal cells で あ っ た. 2. Cultivate し た bile duct epithelial cells は CK7 positive cells で あ り, biliary atresia は what ら か の exogenous に よ り bile duct の tectonic が broken 壊 さ れ た も の で あ る と exam え ら れ た.

项目成果

胆道閉鎖症治療における問題点と小児外科医の課題

胆道闭锁治疗中的问题及小儿外科医生面临的挑战

• 发表时间: 2006
• 期刊: 外科治療 94・2
• 作者: Sato;Y;Sugano E;Abe T;Yoshioka Y.;Sato H.;Miyazawa I.;富田 浩史;暁 清文;暁 清文;Takahisa Tainaka;Tsuyoshi Shinohara;Wataru Sumida;安藤久實
• 通讯作者: 安藤久實

Living donor liver transplantation for congenital absence of the portal vein in a child with cardiac failure.

活体肝移植治疗心力衰竭儿童先天性门静脉缺失。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Pediatr Surg 41
• 作者: T.Tainaka;K.Kaneko;K.Kaneko;T.Tainaka;T.Shinohara;T.Tainaka;Y.Ono;W.Sumida
• 通讯作者: W.Sumida

Hepatolithiasis after hepatic portoenterostomy for biliary atresia.

胆道闭锁肝门肠造口术后肝内胆管结石。

• 发表时间: 2006
• 期刊: J Pediatr Surg 41
• 作者: T.Tainaka;K.Kaneko;K.Kaneko;T.Tainaka;T.Shinohara;T.Tainaka
• 通讯作者: T.Tainaka

看護のための最新医学講座-ヒルシュスプリング病と類縁疾患-

最新护理医学课程 - 赫希弹簧病及相关疾病 -

• 发表时间: 2005
• 作者: Sato;Y;Sugano E;Abe T;Yoshioka Y.;Sato H.;Miyazawa I.;富田 浩史;暁 清文;暁 清文;Takahisa Tainaka;Tsuyoshi Shinohara;Wataru Sumida;安藤久實;安藤久實;藤本康弘;K.Kanako;Hisami Ando;Yasukawa T;安藤久實;Kato A;安藤久實
• 通讯作者: 安藤久實

肝移植・小腸移植の現状と展望

肝移植和小肠移植的现状与展望

• 发表时间: 2006
• 期刊: 現代医学 54・2
• 作者: Sato;Y;Sugano E;Abe T;Yoshioka Y.;Sato H.;Miyazawa I.;富田 浩史;暁 清文;暁 清文;Takahisa Tainaka;Tsuyoshi Shinohara;Wataru Sumida;安藤久實;安藤久實;藤本康弘
• 通讯作者: 藤本康弘