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口腔癌でのPDE関連診断法の確立-オーダーメイド治療に向かって-

口腔癌PDE相关诊断方法的建立 - 走向定制化治疗 -

基本信息

批准号：
17659631
负责人：
田川俊郎
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659631/
关键词：
phosphodiesterase 口腔癌オーダーメイド治療悪性黒色腫骨肉腫

项目摘要

Phosphodiesterase(PDE)は細胞内のcAMPやcGMPを分解する酵素で,その濃度を調節する非常に重要な役割を担っている。現在,11種類(PDE1からPDE11)のファミリーに分類され,各ファミリーはアミノ酸配列相同性を示すサブファミリーがある場合がある。そこで本研究は,各PDEのサブファミリーの発現やPDE遺伝子異常を各口腔癌細胞で世界に先駆けて明らかにし,PDEの細胞内シグナル伝達の側面から口腔癌を診断し,オーダーメイド治療へ向かおうとする全く新しい試みである。悪性腫瘍細胞でのPDEの発現は,細胞よりトータルRNAを抽出し,電気泳動でトータルRNAの状態を確認した。RTでcDNAを合成後PCRで増幅し,電気泳動でPCR産物のサイズを確認した。PDE遺伝子異常はPCR産物をTA cloningにてプラスミドベクターに導入後,大腸菌にプラスミドベクターをトランスフェクションし,寒天プレート上でコロニーを選択した。選択したコロニーをLB培地で培養し,プラスミドを精製した。目的のPDEが挿入されているのを制限酵素処理で確認後,濃度を測定,シークエンサーでシークエンスを行った。ヒトロ腔由来悪性黒色腫PMP細胞ではPDE2Aが非常に高発現していた。また,PDE2A遺伝子の検討では,2カ所遺伝子異常(C→T,C→T)が確認できたが,アミノ酸レベルでは異常は認められなかった。今後はこの遺伝子異常をがん診断用DNAチップ等に応用するとともに,将来個人に最適なオーダーメイド治療への道を開いて行く予定である。

Phosphodiesterase (PDE) intracellular cAMP cGMP decomposes the enzyme, and the temperature is very important. At present, there are 11 categories (PDE1 PDE11) that are classified into different categories, and the same configuration of acid in each system indicates that they are in line with each other. In this study, all PDE patients showed that PDE cells were not detected in the whole world, and PDE cells were detected in the whole world. The PDE was detected, the RNA was extracted, and the electrophoretic activity was detected. The RNA status was confirmed. After the RT cDNA was synthesized, the PCR was scanned, and the electrophoretic PCR was used to confirm the error. PDE children often buy PCR materials, such as TA cloning, cold weather, cold weather and cold weather. Choose to make sure that the LB is ready to grow, and that you need to learn more about it. Objective to determine the degree of restriction enzyme by PDE. After the restriction enzyme was verified, the temperature was determined. The origin of the cavity is black, the PMP cell, the PDE2A, and the height is very high. Please make sure that you are not aware of what you are doing, and that you are very sour and sour. If you do not know what to do, you will not be able to tell you what to do. If you are not PDE2A, you will not know what you are doing. In the future, you will not be able to use DNA and other health care devices in the future. In the future, you will be the most expensive person to start a health care program.