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超音波振動照射による巨大蛋白質のプロトン高分解能NMR測定法の開発

利用超声波振动照射开发巨型蛋白质质子的高分辨率核磁共振测量方法

基本信息

批准号：
18655029
负责人：
桑原大介
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Electro-Communications
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18655029/
关键词：
機器分析蛋白質生体系高分子 NMR 立体構造解析

项目摘要

本研究では,超音波振動子を用いて,溶媒とそこに加えられた"分子量の大きな蛋白質試料"を激しく揺動させることを目指している.この状態の下でNMR信号を観測することにより,巨大蛋白質のプロトンNMRスペクトルの分解能を,格段に向上させることを目的とする.今年度は最初にNMR信号に混入してくる高周波ノイズをデカップルするための方式(バイパスコンデンサ方式)を見直すことを行った.最初の工夫としてNMRプローブ内部に銅管を逼し,その中に超音波振動子駆動電流ラインを通すことを行った.さらに銅管の接地面と電流ラインの間にバイパスコンデンサを数個挿入する工夫を行ったところ,NMR信号に混入するノイズ強度は,以前と比較して半分以下となった.この他にもNMRプローブ自体のグランドラインの接地を工夫してみたが,目だった効果は現れなかった.高周波ノイズの問題はある程度改善できたので,続いて超音波振動子の最適化を行うことにした.TiZrセラミック振動子については,ソフト材とハード材2種類のものを用いた.それぞれをNMRプローブに設置した後,振動周波数を100kHz〜800kHzまで変えて1^H NMR測定を行った.試料としては,アダマンタンを溶媒に加えた標準試料を用いた.その結果,ハード材TiZrセラミック振動子を用いて300kHzの振動を加えた場合に,最も高い分解能が得られることが判明した.この後は標準試料を離れて,巨大蛋白質のモデル物質であるTentaGelビーズ直結高分子を使って実験を行う予定である.

In this study, ultrasonic vibration is used in the medium, solvent and solvent to increase the molecular weight of protein samples. The NMR signal under this condition is measured at the end of the spectrum, and the resolution energy of the giant protein is determined at the end of the spectrum. This year, the NMR signal is mixed with high frequency signals. At first, the NMR was applied to the inner part of the copper tube, and the ultrasonic vibrator was applied to the inner part of the copper tube. The ground plane of the copper pipe is connected to the current level. The NMR signal is mixed with the current level for several minutes. This is the first time in history that a person has been involved in an NMR investigation. The problem of high frequency ultrasonic vibration is improved to a certain extent, and the optimization of ultrasonic vibrator is carried out.TiZr vibrator is used in the optimization of ultrasonic vibrator, and the material is used in the optimization of ultrasonic vibrator. After the NMR settings are set, the frequency of vibration is from 100kHz to 800kHz and 1H NMR measurements are performed. The sample was added to the solvent. As a result, the highest decomposition energy was obtained when the vibration of TiZr was increased at 300kHz. After this, the standard sample was separated and the giant protein was separated from the material. TentaGel was used as a direct polymer.