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自立複製型経ロファージワクチンの開発

自主复制传染性噬菌体疫苗的开发

基本信息

批准号：
18656241
负责人：
丹治保典
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸菌ファージT2頭殻表層に抗原タンパク質を提示したファージワクチンを分子構築し、マウスを用いた動物実験を実施した。研究対象とした抗原タンパク質はSalmonellaの鞭毛タンパク質FliC(H1抗原)とFljB(H2抗原)である。T2ファージ頭殻タンパク質の一つであるSOCをコードするsoc遺伝子下流にβ-galactosidase遺伝子を持つT2βファージは青色のプラークを形成する。FliCとFljBをコードする遺伝子をsoc周辺遺伝子を含むプラスミドに挿入し、これらプラスミドによる形質転換体大腸菌にT2βファージを感染させ、相同組換によりSOCとFliCまたはFljBを共発現するキメラファージ(ワクチン)を分子構築した。これらファージワクチンを用い、以下の実験を行った。実験系(4系列、各系列に6匹のマウスを使用)A: 非投与群(ネガティブコントロール)B: 精製タンパク質投与群C: ファージワクチン投与群D: ファージワクチンと宿主大腸菌投与群C,D群では投与したファージワクチンがマウス糞便に検出されたが、投与5日以降は検出されなかった。糞便に含まれる抗原特異的IgA産生量をELISA法により定量した。B,C,D群からFlicとFljB特異的IgA産生が認められ、そのタイターはB、C群で同等だった。ファージ提示型抗原タンパク質量はB群に投与した精製タンパク質量の1%以下であるが、B群と同等の抗体産生能を示したことからファージ提示型抗原がワクチンとして利用できることが示された。

E. coli is the first type of bacteria to be used in animal research. Study on the antigen-specific proteins of Salmonella flagellates FliC(H1 antigen) and FljB(H2 antigen) T2β-galactosidase gene is formed in the downstream of SOC gene. FliC and FljB have the same molecular structure as SOC and FljB, and the same structure as SOC and FljB has the same molecular structure. The following is an example of how to use the Internet. A: Non-cast and group (4 series, 6 pieces for each series) B: Refined cast and group C: White cast and group D: White cast and group C, group D: Reverse cast and group D: Reverse cast and group D Fecal antigen specific IgA production was quantified by ELISA. B,C,D groups Flic FljB specific IgA production The quality of the suggested antigen is less than 1% of the mass of the group B and the equivalent antibody production is shown in the following table.