ポリアクリルアミドゲルを担体とした伸展培養法の開発

以聚丙烯酰胺凝胶为载体的延伸培养方法的开发

基本信息

  • 批准号:
    18657061
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.05万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ポリアクリルアミドーコラーゲン共重合体を基質とした、伸展培養系で再現性の高い培養条件検討を、主にその装置の改良を中心に行った。アクリルアミドシートを保持する、従来のステンレスの針金をフレームとした装置は作成が容易であったが、シートの平面性の保持と、フレームからはずしたシートの高倍率での顕微鏡観察に難点があった。今年度はこのゲル保持装置の全面的な改善を行った。アクリルアミドシートは、18mm角の窓を持つ2枚のステンレス薄板の間に保持し、さらにその底面を0.2mm厚のポリカーボネートシートで補強することにより、平面性を確保した。また、作成した装置の滅菌法も、オートクレーブ法から紫外線滅菌とし、コラーゲンの極性に関する実験が可能となった。この装置を使用し、DMMEM培地を使用した定法でニワトリ初期胚から調製した線維芽細胞の増殖と運動性を検討した。アクリルアミドシート上ではプラスチックディシュまたはカバーガラスなどの硬い基質面と比較し、細胞の増殖が、細胞密度とシートの平面性に大きく依存する。特に、シートのマクロな平面性は細胞を播いてから24時間以内の細胞接着性に強く影響を及ぼす。平面性の低下は、フォーカルコンタクトの形成および細胞質分裂の異常を引き起こす可能性がしめされた。興味深いことに、アクリルアミドゲル濃度よりは、シートにかけた伸展張力のほうが、接着性ならびにその後の増殖速度に及ぼす影響は大きかった。また、接着能が低下した細胞の一部がアポトーシスを起こすことが明らかになった。これらの結果は、アクリルアミドシート上で培養初期に細胞の方向をコントロールできる可能性を示唆している。さらにニワトリ筋芽細胞を用いた実験では、伸展により崩壊した筋原線維が再構成されることが示された。
ポリアクリルアミドーコラーゲン co-overlapping matrix とした, stretch culture system The culture conditions with high reproducibility have been improved, and the improvement of the main equipment has been carried out in the center.アクリルアミドシートをKEEP する、従来のステンレスのneedle gold をフレームとした device は EASY to make であったが、シートのPlanarity maintenanceのと、フレームからはずしたシートのHigh magnification microscopic observation is a difficult point があった. This year, we have made comprehensive improvements to our maintenance equipment.アクリルアミドシートは、18mm corner の窓をhold つ2 pieces のステンレス thin plate の间にhold し、さらにThe base of the base is made of 0.2mm thick のポリカーボネートシートで reinforced することにより, and the flatness is ensured. The sterilization method of the device, the sterilization method of the device, the ultraviolet sterilization method of the オートクレーブ method, the polarity of the コラーゲンのpolar switch, the possibility of となった. The use of the equipment and the use of DMMEM are the method of determining the modulation of early embryos and the proliferation and motility of line-dimensional bud cells.アクリルアミドシート上ではプラスチックディシュまたはカバーガラスなどのhard Comparison of matrix surface, cell proliferation, and cell density dependence on planarity. Special, シートのマクロな flatness, cell を broadcast, and いてから, the cell adhesion within 24 hours has a strong influence on を and ぼす. The possibility of abnormality of cytoplasmic division and the possibility of abnormality of flatness and flatness. The depth of interest, the depth of interest, the depth of アクリルアミドゲル, the concentration of よりは, and the expansion of シートにかけたThe strength is good, the adhesion is good, the growth rate is good, and the impact is big.また, then can が が し た cell の一 が ポ ト ー シ ス を 出こ す こ と が 明 ら か に な っ た. The result and direction of the cells in the initial stage of culture and the possibility of アククリルアミドシート are shown in the figure. The さらにニトリ muscle bud cell を is reconstructed from the いた実験では and the stretched によりcollapse したsujihara line dimension がされることがshows された.

项目成果

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黒田 正明其他文献

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