伸縮性コラーゲンを用いた歯根膜細胞の伸展培養と細胞配向制御した人工歯根膜の作成

使用可拉伸胶原蛋白拉伸培养牙周膜细胞并创建具有受控细胞方向的人工牙周膜

• 批准号: 18800002
• 负责人: 永井 展裕
• 金额: $ 1.78万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18800002/
• 关键词: 細胞シート; 歯根膜細胞; 重層化; サケコラーゲン; コラゲナーゼ; 血管内皮細胞; 血管新生; 人工歯根膜; 歯根膜; 伸展培養; コラーゲン; 鮭; 細胞配向

本研究は、鮭皮コラーゲンを用いて作製した歯根膜細胞シートを3枚重層化し、かつこの重層化組織を伸展培養することによって細胞配向させた生体擬似人工歯根膜を作製することを目的とした。H18年度は細胞シート化条件と重層化方法を検討した結果、歯根膜細胞シート3枚を重層化することによって人工歯根膜様組織を作製できることを報告した。一方、組織内部で栄養・酸素不足に伴う壊死が起こっていることが確認された。そこでH19年度はまず内部壊死を改善するために、組織内部に血管網を導入する検討を行った。予備試験において、血管内皮細胞(human umbilical vein endothelial cells; HUVEC)は歯根膜細胞(human periodontal ligament cells; HPDL)上で血管新生因子(VEGF,FGF)を含む血管新生培地(EGM-2)を用いて共培養したときのみ、毛細血管様のキャピラリーを形成することがわかった。そこで、HPDLとHUVECをEGM-2で共培養した後に細胞シート化し、この共培養シートを3枚重層化してEGM-2で培養した。その結果、重層化組織内部にはCD31抗体反応陽性のHUVECが組織全体に観察された。また一部にキャピラリー様のHUVCEが見られた。さらにヘマトキシリンエオシン染色から、HUVEC共培養組織はHUVECなしの組織に比べて内部の細胞密度が高く、壊死が改善されている傾向にあった。また、マッソントリクローム染色から、HUVEC共培養組織の内部に豊富なマトリックス産生が観察された。以上より、HUVEC共培養によって内部壊死を改善した人工歯根膜を作成できることが示唆された。次にこの人工歯根膜の伸展培養を行う予定であったが、壊死改善検討に時間を要したため行うことができなかった。しかしながら、内部にHUVECを有する人工歯根膜組織の開発例はなく、学術的に新規な成果を得たと考えている。

This study は, salmon skin コ ラ ー ゲ ン を with い て cropping し た 歯 root membrane cells シ ー ト を three stratification し, か つ こ の heavy layer organization を stretch fostering す る こ と に よ っ て cells with to さ せ た artificial membrane を 歯 root as a raw body quasi system す る こ と を purpose と し た. H18 annual は cells シ ー ト mineralization conditions と heavy layer method を beg し 検 た results, 歯 root membrane cells シ ー ト three を heavy stratification す る こ と に よ っ て を others organizations for artificial 歯 root membrane system で き る こ と を report し た. One party, within the organization, there is a deficiency of で栄 nutrients and acids に accompanied by う壊 death が, <s:1> って る る とが とが confirmation された. Annual は そ こ で H19 ま ず internal 壊 die を improve す る た め に に vascular network, organization を import す る 検 line for を っ た. Prepared experiments: にお て て, vascular endothelial cells (human umbilical vein endothelial cells; HUVEC) にお 歯 root membrane cells (human periodontal ligament cells; HPDL) で angiogenic factors (VEGF, FGF) contains を む angiogenesis petty (EGM - 2) を い て trained し た と き の み, capillary others の キ ャ ピ ラ リ ー を form す る こ と が わ か っ た. そ こ で, HPDL と HUVEC を EGM - 2 で trained し た に cells after シ ー ト し, こ の trained シ ー ト を three heavy stratification し て EGM - 2 で cultivate し た. Youdaoplaceholder0 そ results: the internal に に CD31 antibody of the stratified tissue is counteractive 応 positive <s:1> HUVECが tissue as a whole に観 examination された. Youdaoplaceholder0 a にキャピラリ にキャピラリ sample of が HUVCEが see られた. さ ら に ヘ マ ト キ シ リ ン エ オ シ ン dyeing か ら and HUVEC training organization は HUVEC な し の organization に than べ て internal high cell density が の く 壊 die が improve さ れ て い る tendency に あ っ た. ま た, マ ッ ソ ン ト リ ク ロ ー ム dyeing か ら and HUVEC training organization の internal に aboundant な マ ト リ ッ ク ス produce が 観 examine さ れ た. Above よ り and HUVEC cultivate に よ っ て internal 壊 die を improve し た artificial 歯 root membrane を made で き る こ と が in stopping さ れ た. Time に こ の を 歯 root membrane の extend breeding line う designated で あ っ た が, 壊 die improve beg に 検 time を し た た め line う こ と が で き な か っ た. し か し な が ら, internal に HUVEC を have す る artificial 歯 root membrane organization の have 発 は な く and academic achievements of new rules な に を た と exam え て い る.

项目成果

Development and commercialization of biomaterials using salmon atelocollagen

使用鲑鱼去端胶原的生物材料的开发和商业化

• 发表时间: 2006
• 期刊: 2006 FALL KSBB MEETING
• 作者: Tsukamoto;K.;et.al.;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;Y.Imai;Y.Imai;Y.Imai;中原和哉;K. Oikawa;浦野貴裕;浦野貴裕;Io NAKAYAMA;Hidenori TAKAUJI;高氏秀則;中山伊央;中山伊央;中山伊央;高氏秀則;高氏秀則;Hidenori Takauji;Io Nakayama;高氏秀則;Ichiro Takahashi;Taisuke Masuda;井原 慶児;永井 展裕;永井 展裕;永井 展裕;永井 展裕
• 通讯作者: 永井 展裕

鮭皮コラーゲンのパイオマテリアル化技術の開発と商品化

三文鱼皮胶原蛋白生物材料技术的开发和商业化

• 发表时间: 2006
• 期刊: 第58回 日本生物工学会大会 講演要旨集
• 作者: Tsukamoto;K.;et.al.;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;Y.Imai;Y.Imai;Y.Imai;中原和哉;K. Oikawa;浦野貴裕;浦野貴裕;Io NAKAYAMA;Hidenori TAKAUJI;高氏秀則;中山伊央;中山伊央;中山伊央;高氏秀則;高氏秀則;Hidenori Takauji;Io Nakayama;高氏秀則;Ichiro Takahashi;Taisuke Masuda;井原 慶児;永井 展裕;永井 展裕
• 通讯作者: 永井 展裕

Development of biomaterials using salmon collagen

使用鲑鱼胶原蛋白开发生物材料

• 发表时间: 2007
• 期刊: The 3^<rd> Japan-UK Symposium on Promotion of Regional Partnerships on Nanotechnology Development
• 作者: Tsukamoto;K.;et.al.;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;Y.Imai;Y.Imai;Y.Imai;中原和哉;K. Oikawa;浦野貴裕;浦野貴裕;Io NAKAYAMA;Hidenori TAKAUJI;高氏秀則;中山伊央;中山伊央;中山伊央;高氏秀則;高氏秀則;Hidenori Takauji;Io Nakayama;高氏秀則;Ichiro Takahashi;Taisuke Masuda;井原 慶児;永井 展裕
• 通讯作者: 永井 展裕

魚類コラーゲンscaffoldを用いた人工歯根膜祖組織の作成

利用鱼胶原蛋白支架创建人工牙周膜组织

• 发表时间: 2006
• 期刊: 第58回 日本生物工学会大会 講演要旨集
• 作者: Tsukamoto;K.;et.al.;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;Y.Imai;Y.Imai;Y.Imai;中原和哉;K. Oikawa;浦野貴裕;浦野貴裕;Io NAKAYAMA;Hidenori TAKAUJI;高氏秀則;中山伊央;中山伊央;中山伊央;高氏秀則;高氏秀則;Hidenori Takauji;Io Nakayama;高氏秀則;Ichiro Takahashi;Taisuke Masuda;井原 慶児;永井 展裕;永井 展裕;永井 展裕
• 通讯作者: 永井 展裕

鮭皮コラーゲンのバイオマテリアル化技術の開発と商品化

三文鱼皮胶原蛋白生物材料技术的开发和商业化

• 发表时间: 2007
• 期刊: 生物工学会誌 85巻・3号
• 作者: Tsukamoto;K.;et.al.;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;塚本健太郎;Y.Imai;Y.Imai;Y.Imai;中原和哉;K. Oikawa;浦野貴裕;浦野貴裕;Io NAKAYAMA;Hidenori TAKAUJI;高氏秀則;中山伊央;中山伊央;中山伊央;高氏秀則;高氏秀則;Hidenori Takauji;Io Nakayama;高氏秀則;Ichiro Takahashi;Taisuke Masuda;井原 慶児
• 通讯作者: 井原 慶児