遺伝子組換え食品安全性評価技術の開発

转基因食品安全评价技术发展

• 批准号: 18658002
• 负责人: 平野 久
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658002/
• 关键词: 遺伝子組換え食品; プロテオーム; 目的外タンパク質; エンドウ; ベニザケ; 形質転換体

本研究は、遺伝子組換え食品の安全性を評価するため、遺伝子組換え生物におけるタンパク質の変動を漏れなく解析することができるプロテオーム解析技術を確立することを目的とする。本年度は、質量分析装置によって定量的にディファレンシャルディスプレイ分析ができるiTRAQ法を用いて形質転換体で特異的に発現するタンパク質を効率的に検出できるかどうかを調べた。まず、ベニザケのI型成長ホルモン(GH)遺伝子をマイクロインジェクション法によってアマゴに導入し、体長が非形質転換体の約10倍になった形質転換体を得た。このGH遺伝子組換えアマゴのF1及びF2個体を作出し、外来GH遺伝子が生殖細胞に取り込まれた個体を育成した。このGH遺伝子組換えアマゴとその兄弟にあたる非組換え体のタンパク質組成の違いをiTRAQ法で調べた。iTRAQ法は、質量の異なるタグを含む試薬を異なる個体から抽出したタンパク質のプロテアーゼ消化物に別々に標識した後、各個体からの標識ペプチドを混合し、MS/MSモードの質量分析装置で分析する方法である。タグの質量スペクトルから異なる個体の特定のタンパク質の量比を、また、ペプチド部分のMS/MS解析によってアミノ酸配列を明らかにすることができる。そして、アミノ酸配列からデータベース検索によってタンパク質を同定することができる。iTRAQ法による分析の結果、形質転換体において転写・翻訳などのタンパク質合成に関わるタンパク質複合体やペントースリン酸経路の酵素群の発現が上昇していること、また、解糖系酵素群の発現が低下していることを確認することができた。iTRAQ法は、形質転換体におけるタンパク質発現の質的及び量的変動を容易に捉えることができる優れた方法であると考えられた。

This study aims to establish the analytical techniques for food safety assessment and quality control of food products. This year, the quality analysis device is used to analyze the quality of the product. The iTRAQ method is used to analyze the quality of the product. A new type I growth hormone (GH) gene was obtained by introducing a new type of GH gene into a new type of GH gene. The GH gene group was replaced by F1 and F2 individuals, and the foreign GH gene was selected for breeding. This is the first time I've ever been to a school. The iTRAQ method includes the identification of individual samples, the identification of individual samples, and the analysis of MS/MS mass analyzer. The MS/MS analysis of the mass spectrum of the individual with the mass spectrum difference shows that the mass ratio of the individual with the mass spectrum difference is different. The quality of the product is the same as the quality of the product. The results of iTRAQ analysis showed that the expression of enzyme group of protein complex, enzyme group of acid pathway and enzyme group of glycolytic system increased and decreased in the case of protein synthesis. iTRAQ method is easy to detect, qualitative and quantitative changes

项目成果

新素材DLC基板を用いたプロテインチップの開発, 新しいDNAチップの科学と応用

新材料DLC基板的蛋白质芯片开发、新型DNA芯片的科学与应用

• 发表时间: 2007
• 作者: Morita A;Miyagi E;Yasumitsu E;Kawasaki H;Hirano H;Hirahara F;平野 久;平野 久
• 通讯作者: 平野 久

Protein kinase C epsilon phosphorylates keratin 8 at Ser8 and Ser23 in GH4C1 cells stimulated by thyrotropin-releasing hormone.

在促甲状腺激素释放激素刺激的 GH4C1 细胞中，蛋白激酶 C epsilon 磷酸化角蛋白 8 Ser8 和 Ser23。

• 发表时间: 2007
• 期刊: FEBS J. 274
• 作者: Akita Y;Kawasaki H;Imajoh-Ohmi S;Fukuda H;Ohno S;Hirano H;Ono Y;Yonekawa H.
• 通讯作者: Yonekawa H.

食品の安全性とプロテオミクス

食品安全和蛋白质组学

• 发表时间: 2007
• 作者: Morita A;Miyagi E;Yasumitsu E;Kawasaki H;Hirano H;Hirahara F;平野 久
• 通讯作者: 平野 久

On-chip identification and interaction analysis of gel-resolved proteins using a diamond-like carbon-coated plate.

使用类金刚石碳涂层板对凝胶解析蛋白质进行芯片上鉴定和相互作用分析。

• 发表时间: 2007
• 期刊: J. Proteome Res. 6
• 作者: Iwafune;Y.;Tan;J.Z.;Ino;Y.;Okayama;A.;Ishigaki;Y.;Saito;K.;Suzuki;N.;Arima;M.;Oba;M.;Kamei;S.;Tanga;M.;Okada;T.;Hirano;H.
• 通讯作者: H.

S locus F-Box brothers:: Multiple and pollen-specific F-box genes with S haplotype-specific polymorphisms in apple and Japanese pear

• DOI: 10.1534/genetics.106.068858
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: GENETICS
• 影响因子: 3.3
• 作者: Sassa, Hidenori;Kakui, Hiroyuki;Koba, Takato
• 通讯作者: Koba, Takato