植物細胞・組織の常温ガラス化による新たな長期保存法の開発

利用植物细胞和组织的室温玻璃化技术开发一种新的长期保存方法

基本信息

  • 批准号:
    18658040
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.18万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ゼニゴケ培養細胞では,高い乾燥耐性を誘導するためには,細胞をショ糖の含む培地で前培養する必要があり,十分に耐性が高まった細胞は,その含水量が0.05gH_2O/gDW以下になっても高い生存率を示す。この前培養時には,細胞内に複数の熱可溶性タンパク質を含むタンパク質の合成と糖の蓄積が起こる。さらに,乾燥による含水量の低下に伴い,ガラス転移温度以下では細胞内はガラス状態になる。本研究では,細胞の乾燥耐性,ガラス化と熱可溶性タンパク質および糖の関係についてさらに検討し,以下のような結果を得た。(1)前培養時にタンパク合成阻害剤の処理により熱可溶性タンパク質の合成が阻害され,同時に細胞の乾燥耐性が低下した。また,細胞のガラス転移温度が低温側にシフトした。したがって,この熱可溶性タンパク質は細胞の乾燥耐性とガラス形成に関わっていることが示唆された。(2)この熱可溶性タンパク質はいわゆるLEAタンパク質の可能性は高く,さらなる分析を行った。(3)一方,同様な前培養をシロイヌナズナ培養細胞で行ったが,細胞内での糖の蓄積が起こったが,熱可溶性タンパク質の合成は認められず,乾燥耐性の高い増加も見られなかった。しかし,乾燥による含水量の低下と共に生存率は失われるが,細胞はガラス状態になることが明らかになった。(4)これらの細胞における含水量とガラス転移温度の関係についてDSCを用いて詳細に解析すると共にFHRによる解析も試みた。(5)前培養したゼニゴケ培養細胞からプロトプラストを単離し,その乾燥耐性を調べ,培養細胞と同様に高い乾燥耐性を示すことを確かめた。(6)この単離プロトプラストを用いて,細胞内にタンパク質や糖を導入するためのリボソームとの融合条件について検討した。(7)また,FITCで標識したレクチンによるプロトプラスト表面の蛍光染色を行い,乾燥あるいは吸水時の細胞膜の変化を追跡した。
The cells cultured in the medium were highly resistant to desiccation, and the cells cultured in the medium containing glucose were highly resistant to desiccation, and the water content was less than 0.05gH_2O/gDW. Before the culture, the accumulation of multiple heat soluble substances in the cells began. In addition, drying is accompanied by a decrease in water content, which is accompanied by a decrease in intracellular temperature. In this study, we investigated the relationship between desiccation tolerance, chemical and thermal solubility of cells, and the following results were obtained. (1)In the pre-culture, the synthesis of heat soluble substances was inhibited and the drying tolerance of the cells was reduced. In addition, the temperature of the cell is different from that of the low temperature side. The heat soluble substance is related to the desiccation tolerance of the cell and the formation of the cell. (2)The possibility of thermal solubility is high, and the analysis is carried out. (3)In one way, the same culture before the culture of cells, the accumulation of sugar in the cells began, the synthesis of heat soluble substances began, and the drying tolerance increased. The water content of the cells is low, and the survival rate is low. (4)The relationship between water content and temperature shift in the cells was analyzed in detail by DSC and FHR. (5)Before the culture, the cells were cultured and the desiccation tolerance was adjusted. The cells were cultured and the desiccation tolerance was improved. (6)The fusion conditions of the protein and sugar in the cell are discussed. (7)The FITC label was used to trace the changes in the cell membrane when it was dried and absorbed water.

项目成果

期刊论文数量(7)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
植物培養細胞の乾燥時のガラス形成
培养植物细胞干燥过程中的玻璃形成
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    畑中 理恵;菅原 康剛
  • 通讯作者:
    菅原 康剛
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    佐山 秀明;菅原 康剛
  • 通讯作者:
    菅原 康剛
ゼニゴケ及びシロイヌナズナ培養細胞の常温におけるガラス化
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    畑中 理恵;菅原 康剛
  • 通讯作者:
    菅原 康剛
植物培養細胞の乾燥耐性とガラス形成
培养植物细胞的干燥耐受性和玻璃形成
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    畑中 理恵;菅原 康剛
  • 通讯作者:
    菅原 康剛
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