腸管上皮細胞株を用いたM細胞分化特異的サブトラクション・ライブラリーの構築

使用肠上皮细胞系构建M细胞分化特异性消减文库

• 批准号: 18658104
• 负责人: 麻生 久
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18658104/
• 关键词: マウス腸管上皮細胞株; MIE細胞; M細胞分化誘導; マイクロアレイ解析; M細胞特異的遺伝子; CD3抗体; 抗CD28抗体; パイエル板リンパ球; 腸管リンパ球; 抗CD3抗体; T細胞活性化

本研究は、M細胞の機能解明およびM細胞分化特異遺伝子の同定を目的とし、マウス腸管上皮細胞(MIE)のM細胞分化誘導系を用いて、M細胞分化関連遺伝子プロファイルを作成し、M細胞分化特異遺伝子の単離を試みるものである。MIE細胞のM細胞分化は、パイエル板リンパ球(PPL)を抗CD3/CD28抗体で処理してT細胞の活性化を促すことにより誘導される。今年度は、MIE細胞単独培養、MIE細胞とPPLの共培養およびMIE細胞と抗体処理PPLとの共培養を行い、各培養系よりtotal RNAを抽出し、M細胞分化時に発現する遺伝子群を同定する目的で、45101遺伝子に関するマイクロアレイ解析(Affimetrix社)を行った。解析ソフトは、Genespring GX7.3.1(Agilent Technologies社)を用いた。発現変化のパターンは9パターンあり、M細胞分化区で発現が上昇・減少する遺伝子が含まれていると考えられる発現変化パターンに着目した。その結果、M細胞分化誘導区において発現が上昇する遺伝子は、403遺伝子であり、その中でprobeの信頼性の高い遺伝子を選抜した(107遺伝子)。また、発現が減少する遺伝子は460遺伝子であり、probeの信頼性から56遺伝子に絞り込んだ。M細胞分化誘導区において発現が上昇し、probeの信頼性から絞り込んだ107遺伝子に着目し、その中から明らかにリンパ球由来と考えられる遺伝子をRefdicデータベースにより削除した。最終的には、MIE細胞のM細胞分化過程で発現が上昇すると考えられる遺伝子を10前後まで絞り込むことに成功した。

This study aims to elucidate the function of M cells and identify M cell differentiation-specific genes, to develop M cell differentiation-inducing lines for intestinal epithelial cells (MIE), to construct M cell differentiation-related genes, and to develop M cell differentiation-specific gene isolation assays. M cell differentiation of MIE cells was induced by treatment with anti-CD3/CD28 antibodies. This year, MIE cell culture alone, co-culture of MIE cells and PPL, and co-culture of MIE cells and antibody-treated PPL were performed. Total RNA was extracted from each culture line. The gene subpopulation generated during M cell differentiation was determined. The 45101 gene was analyzed by Affitrix. Genespring GX7.3.1(Agilent Technologies) is available for use. The expression of M cell differentiation region increased and decreased, and the expression of M cell differentiation region increased and decreased. As a result, M cell differentiation-inducing regions were found to be elevated in 403 genes, and in 107 genes. 460 traces, 56 traces of probe information M cell differentiation induction zone is rising, probe's signal quality is rising, probe ' Finally, MIE cells and M cells differentiation process began to rise.

项目成果

Immunohistochemical characterization of cell types expressing the cellular prion protein in the small intestine of cattle and mice.

牛和小鼠小肠中表达细胞朊病毒蛋白的细胞类型的免疫组织化学特征。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Histochem Cell Biol 127(3)
• 作者: Yoichi;Honda;Junko;Watari;Naofumi;Sakatoku;Takahito;Watanabe;Takashi;Watanabe;Y.Arima;Miyazawa K et al.
• 通讯作者: Miyazawa K et al.

ウシWC1+γδT細胞のIL-2刺激による分化誘導

IL-2刺激牛WC1+γδT细胞分化诱导

• 发表时间: 2008
• 作者: Tsukamura;H.;Tadashi Yamasaki;束村博子;M.Tohno;Yuko Miyake;上野山賀久;Kohtaro Miyazawa;上野山賀久;Kohtaro Miyazawa;束村博子;Nagai Y.;大蔵聡;田中沙智
• 通讯作者: 田中沙智

ブタ腸管におけるNOD1および2の発現とイムノバイオティクスによる発現増強

NOD1和2在猪肠道中的表达及免疫抗生素增强表达

• 发表时间: 2007
• 作者: 遠野雅徳;植田 渉;島津朋之;森江恭子;麻生久;川井泰;齋藤忠夫;北澤春樹
• 通讯作者: 北澤春樹

Two distinct phenotypes of dendritic cells from bovine peripheral blood.

来自牛外周血的树突状细胞的两种不同表型。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Research in Veterinary Science 81
• 作者: Tadashi Yamasaki;Koji Tahara;Shoichi Takano;Miho Inoue-Murayama;Michael T. Rose;Takeshi Minashima;Hisashi Aso;Shin'ichi Ito;M.Tohno;Yuko Miyake;Kohtaro Miyazawa;Kohtaro Miyazawa
• 通讯作者: Kohtaro Miyazawa

Staining patterns for actin and villin distinguish M cells in bovine follicle-associated epithelium.

• DOI: 10.1016/j.rvsc.2006.05.009
• 发表时间: 2007-04
• 期刊: Research in veterinary science
• 影响因子: 2.4
• 作者: T. Kanaya;H. Aso;Kohtaro Miyazawa;Taketomo Kido;T. Minashima;Kouichi Watanabe;S. Ohwada;H. Kitazawa;M. Rose;Takahiro Yamaguchi