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終末部唾液腺幹細胞の分化能を利用した唾液腺再生医療の開発

利用终末唾液腺干细胞的分化潜能开发唾液腺再生医学

基本信息

批准号：
18659602
负责人：
白砂兼光
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス顎下腺から分離、回収したSP細胞が多分化能をもつ唾液腺幹細胞であるという確証が得られなかった。そこでつぎに、胎児マウス顎下腺からin vitroに分離した細胞が唾液腺組織を構築するか否かについて検討した。胎児期初期(E12からE14)の顎下腺組織を酵素処理し、分散したのち、分散化細胞を高い密度でコラーゲンゲル内にて3次元培養すると、腺管構造を形成した。すなわち、細胞はコラーゲンゲル内で互いに凝集し、12時間後から分枝形成を開始し、多数の小葉の形成に続いて腺管や導管も形成された。しかしながら、培養7日目を過ぎるころからが導管腔が嚢胞状に肥大化した。そこで、コラーゲンゲル内にフィブロネクチンを添加すると分枝形成はより旺盛となり、小葉の数、面積ともに増加し、導管腔の肥大化も抑制された。また、フィブロネクチンと同様の劾果は抗α1やα2インテグリン抗体をコラーゲンゲル内に添加してもみられた。In vitroで再構成された小葉組織の腺腔側にはアクアポリン5の発現や腺腔にはアルシャンブルーに染色される粘液が観察され、再構成組織が出生時期のマウス顎下腺に匹敵する機能形態を備えていることが示唆された。以上の結果をまとめると、1)胎児マウス顎下腺細胞からin vitroで顎下腺組織を再構成することが可能であること、2)組織再構成には初期の細胞凝集や細胞外基質との相互作用が必要であることがわかった。なお、細胞集合塊による組織再構成は細胞集合塊をマウス腎被膜下に移植してもみられる。しかし、成獣マウス顎下腺細胞集合塊からの顎下腺組織再構成には成功していない。

Submandibular gland separation, regression SP cells can be differentiated salivary gland stem cells can be confirmed In addition, it is necessary to study the structure of salivary gland tissue in vitro. The submandibular gland tissue from early fetal stage (E12 to E14) was enzymatically treated, dispersed, and dispersed into high cell density, high cell density, and three-dimensional culture. The gland tube structure was formed. After 12 hours, the formation of branches, most of the leaflets, and the formation of ducts and ducts began. 7 days after culture, the duct lumen became cellular and hypertrophic. The number of leaflets, the area of the leaflets, and the hypertrophy of the catheter lumen are inhibited. The results of the study include the addition of anti-alpha-1 and anti-alpha-2 antibodies. In vitro, the reconstructed lobular tissue was found in the glandular cavity. The reconstructed lobular tissue was found in the glandular cavity. The reconstructed lobular tissue was found in the glandular cavity. The reconstructed lobular tissue was found in the glandular cavity. The reconstructed lobular tissue was found in the submandibular gland. The functional morphology of the reconstructed lobular tissue was prepared. 1) Submandibular gland cells in fetus may be reconstituted in vitro; 2) Cell aggregation and extracellular matrix interaction in early stages of tissue reconstitution are necessary. The cell mass was reconstructed into a subcapsular graft. The submandibular gland cells were collected and reconstructed successfully.