細胞膜の内外各層でドメインを形成する脂質分子のレプリカ免疫電顕法による対応解析

使用复制免疫电子显微镜对细胞膜各层形成结构域的脂质分子进行对应分析

• 批准号: 19659048
• 负责人: 村手 源英
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659048/
• 关键词: 細胞膜; コレステロール; 脂質ラフト; 赤血球; 免疫電子顕微鏡法; クラスター解析; フリーズフラクチャー法; リン脂質; スフィンゴミエリン

細胞膜を構成する脂質二重層の外層と内層におけるリン脂質の分布については、これまで主に赤血球膜を材料にして調べられている。近年、スフィンゴミエリンとコレステロールによって細胞膜上に作られる集積(脂質ラフト)が、細胞がその機能を発揮する上で、特に細胞膜を介した情報や物質の伝達の制御に重要な役割を果たしていると考えられてきたが、その実体はいまだ議論の的となっている。これは、細胞膜構成脂質の2次元における分布について、全く明らかになっていないことによるものと考えられる。そこで本研究では、SDS処理凍結割断レプリカ標識(SDS-FRL)法を用いて細胞膜を構成する主要な脂質の分布を明らかにすること、およびクラスターの内外層における対応関係についての解析に挑むことで、脂質ラフトの実体を明らかにする事を目的としている。本年度は、ホスファチジルコリンおよびホスファチジルイノシトール-4,5-2リン酸の検出に成功し、これまで得られた結果と併せて細胞膜を構成する主要な脂質のすべてを検出することに成功した。これにより、ヒト赤血球において、細胞膜内外層における構成脂質の種類によるクラスターの有無や、統計解析によって見積もられたクラスターの大きさに違いがあることが明らかとなった。赤血球膜において、コレステロールのみが内外層ともにクラスターを形成していること、またその大きさがほぼ同じであることから、これらは対応している可能性があるものと考えられる。以上の研究の一部は国際会議(豊中、大阪、2008、およびアスコーナ、スイス、2008)で発表した。

The cell membrane consists of the outer layer and inner layer of the lipid double layer, the distribution of lipids, and the main components of the red blood cell membrane. In recent years, スフィンゴミエリンとコレステロールによって on the cell membraneられるassemble(lipid ラフト)が、Cell がそのfunction を発水する上で、SpecialにThe cell membrane is introduced and the information is controlled.いると考えられてきたが、その実体はいまだ Discussionの的となっている.これは, cell membrane composition lipids の2-dimensional における distribution について, all く明らかになっていないことによるものと卡えられる. In this study, the SDS-processed freeze-fractured liposome labeling (SDS-FRL) method was used to construct the cell membrane and the main lipid distribution was analyzed.こと, およびクラスターの内内的における対応综合 についてのanalyticにPick むことで, lipid ラフトの実体を明らかにする事をpurpose としている. This year, ホスファチジルコリンおよびホスファチジルイノシトール-4,5-2 リン acid の検出に was successfulし, これまでGET られたRESULTS と and せてThe cell membrane を constitutes するmain なlipid のすべてを検出することにSUCCESS した. There are types of lipids that make up the inner and outer layers of cell membranes, such as red blood cells and red blood cells.无や、Statistical analysisによって见 accumulateもられたクラスターの大きさにvioliいがあることが明らかとなった. Erythrocyte membrane において、コレステロールのみがThe inner and outer layer ともにクラスターをformationしていること、またその大きさがほぼ同じであることから、これらは対応している possibility があるものと卡えられる. The above research is part of the International Conference (Toyonaka, Osaka, 2008, Hiroshima University, 2008).

项目成果

Cholesterol controls lipid endocytosis through rab11.

胆固醇通过 rab11 控制脂质内吞作用。

• 发表时间: 2007
• 作者: Iwamoto K.;et. al.;Murate M.;Murate M.;Murate M.;Murase K.;Murate M.;Iwamoto K.;Takahashi M.
• 通讯作者: Takahashi M.

Curvature-dependent recognietion of ethanolamine phospholipids duramycin and cinnamycin.

乙醇胺磷脂耐久霉素和肉桂霉素的曲率依赖性识别。

• 发表时间: 2007
• 作者: Iwamoto K.;et. al.;Murate M.;Murate M.;Murate M.;Murase K.;Murate M.;Iwamoto K.
• 通讯作者: Iwamoto K.

10N-nonyl acridine orange inhibits cardiolipin polymorphism and mimics Barth syndrome phenotype

10N-壬基吖啶橙抑制心磷脂多态性并模拟巴特综合征表型

• 发表时间: 2008
• 作者: Iwamoto K.;et. al.;Murate M.
• 通讯作者: Murate M.

Curvature-dependent recognition of ethanolamine phospholipids duramycin and cinnamycin.

乙醇胺磷脂耐久霉素和肉桂霉素的曲率依赖性识别。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biophysical Journal 93
• 作者: Iwamoto K.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Cholesterol gradients in biological membrane.

生物膜中的胆固醇梯度。

• 发表时间: 2008
• 作者: Iwamoto K.;et. al.;Murate M.;Murate M.;Murate M.;Murase K.
• 通讯作者: Murase K.