シスプラチンの細胞内画像化,定量化に関する基礎的解析

顺铂细胞内成像和定量的基础分析

• 批准号: 19659304
• 负责人: 櫻井 英幸
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: University of Tsukuba (2008)Gunma University (2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659304/
• 关键词: 放射線治療学; プラチナ製剤; PIXE; 陽子線; 放射線

本研究ではヒト癌細胞へのシスプラチンの取り込み,引き続きおこる核への分布,細胞からの排泄を,大気マイクロピクシー技術により画像解析し,抗腫瘍効果の発現との関係について明らかにする.大気マイクロPIXEによるPtの定量性を確認するために,標準試料(Pt濃度を変化させた寒天を20μmに薄切し凍結乾燥したもの)を作成し,測定を行った.細胞はヒト肺腺癌細胞であるA549を用いて,10μMのBrdUでパルスラベルした対数増殖期の細胞を5μm厚のマイラーフィルム上で培養し,生着したことを確認した後,1mMのシスプラチンを接触させた.接触時間は30分から24時間とした.薬剤に接触後,THAMバッファーで6回洗浄した後,急速凍結乾燥した.解析は日本原子力研究開発機構高崎量子応用研究所の大気マイクロPIXE測定装置を用いた.標準試料を用いた解析では,試料内のシスプラチン濃度と測定されたPtの間に直線性が明らかであった.培養細胞試料では,P,K,Clなどの細胞の局在を示す元素,BrdUでラベルした核内Brおよび細胞に取り込まれたPtが検出可能であった.シスプラチン接触時間の延長とともに,細胞内Ptおよび核内Ptのカウントの増加が観察され,直線性が認められた.大気マイクロピクシーは生物試料に応用可能であるが,さらに検出感度をあげる工夫により,詳細な観察が可能と考えられた.また,このシステムにより肺組織内の重金属の検出ができた症例を経験し,この領域における今後の病理組織診断の一端を担う可能性が示唆された.

This study focuses on the selection of tumor cells, the distribution of tumor cells, the excretion of tumor cells, the characterization of tumor cells, and the relationship between the development of tumor cells and tumor cells. The determination of Pt in the sample was carried out in the cold. The cells were cultured on a 5μm thick medium containing 10 μM BrdU for the growth phase of A549 adenocarcinoma cells, and the growth was confirmed by 1mM BrdU. Contact time 30 minutes 24 hours. After contact,THAM was washed 6 times and then freeze dried rapidly. Analysis and application of PIXE measuring device at Takasaki Institute for Quantum Applications, Japan Atomic Energy Research and Development Agency. Standard samples are analyzed in the middle of the test, and the concentration of the sample is determined by the linearity of Pt. Cultured cell samples contain P,K,Cl and other elements present in the cells,BrdU and Br in the nuclei, and Pt in the cells. The increase of intracellular Pt concentration and nuclear Pt concentration was observed, and the linearity was observed. For example, if you want to use a biological sample, you can use it to detect the sensitivity of the sample. This study shows that the detection of heavy metals in lung tissue is a possible cause of disease, and that the field of pathology is a potential source of future pathological diagnosis.

项目成果

大気マイクロPIXEを用いたヒト肺癌細胞内シスプラチンの可視化,定量化の試み

尝试使用大气微型 PIXE 可视化和量化人类肺癌细胞中的顺铂

• 发表时间: 2007
• 作者: 櫻井 英幸;他
• 通讯作者: 他

Usefullness of intraluminal brachytherapy combined with external beam radiation therapy for submucosal esop-hageal caner: Long-term follow-up results

腔内近距离放射治疗联合外照射治疗粘膜下食管癌的有效性：长期随访结果

• 发表时间: 2009
• 期刊: Int J Radiat Oncol BiolPhys, in press.
• 作者: Ishikawa H;Sakurai H et al.
• 通讯作者: Sakurai H et al.

Direct visualization and quantification of anticancer agent cis-diamminedichloro-platinum(II) in human lung cancer cells using in-air micro-PIXE analysis

使用空气微型 PIXE 分析直接可视化和定量人肺癌细胞中的抗癌剂顺二氨二氯铂 (II)

• 发表时间: 2008
• 期刊: Cancer Science 99
• 作者: Ishikawa H;Sakurai H et al.;Sakurai H. et al.
• 通讯作者: Sakurai H. et al.

Direct visualization and quantification of anticancer agent cis-diamminedichloro-platinum(11) in human lung cancer cells using in-air micro-PIXE analysis

使用空气微型 PIXE 分析直接可视化和定量人肺癌细胞中的抗癌剂顺二氨二氯铂 (11)

• 发表时间: 2007
• 期刊: Cancer Science 99
• 作者: Sakurai H.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

がんの放射線治療アップデート-新しい放射線治療と生物学の関与-

癌症放射治疗更新-新放射治疗和生物学的参与-

• 发表时间: 2009
• 作者: Mochiki E;Shioya M;Sakurai H.;et. al.;櫻井英幸 他
• 通讯作者: 櫻井英幸 他