低酸素レポーター移植担癌マウスと低酸素レポータートランスジェニックマウスの開発

缺氧报告移植荷瘤小鼠及缺氧报告基因转基因小鼠的研制

• 批准号: 19659298
• 负责人: 犬伏 正幸
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: National Institute of Radiological Sciences (2008)Hokkaido University (2007)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19659298/
• 关键词: 分子イメージング; 核医学(PET,SPECT); 低酸素; 放射線治療抵抗性; 遺伝子発現; 悪性種瘍; 疾患モデル動物; トランスジェニックマウス; 核医学(PET, SPECT); 光イメージング; 遺伝子発現イメージング; レポーター遺伝子; 悪性腫瘍(癌); 心臓(心筋)

具体的内容:低酸素レポーター移植担癌マウスは、低酸素応答遺伝子のプロモータ領域に存在する低酸素反応領域(hypoxia response element:HRE)の下流に,核医学レポーター遺伝子であるヒトNa+/I-共輸送蛋白(hNIS)遺伝子を連結した遺伝子構造(HRE/hNIS)を作成して培養癌細胞に安定導入し、ヌードマウスに移植することにより作成する。そのためにまず、HREの下流に生物発光ルシフェラーゼ(Luc)遺伝子を連結したベクターpGL4.26[HRE/Luc]を作成し、癌細胞株に一過性導入した上で低酸素負荷を加えて生物発光強度を測定することによって、HREの低酸素反応性をin vitroで確認した。また、hNISについても、99mTcO4-集積試験によってin vitro評価を、培養癌細胞に安定導入してヌードマウスに移植した担癌マウスを99mTc SPECTでin vivoイメージングして評価を行った。一方、低酸素レポータートランスジェニックマウスは、強力なCAGプロモータの下流にhNISを連結したpCAGGS-hNISを作成し、マウスの受精卵にマイクロインジェクションして子を得た。遺伝子型の確認(genotyping)はできたが、in vivoでの99mTcO4-集積試験系では否定的な結果となった。現在、系統確立に向けて、結果を改善させる方法を模索している。意義・重要性:移植担癌マウスは、(1)放射線治療抵抗性と低酸素との関係に関する研究、(2)低酸素によって活性化される様々な分子過程に関する研究、などに発展する。トランスジェニックマウスは、(1)癌誘発によって自然発生に近い癌に関するin vivo研究、(2)虚血性疾患における低酸素状態に関する研究、などに発展する。さらに、^<18>FAZAや^<18>FMISOによる低酸素PETイメージングと比較することによって、これらの妥当性をin vivoで評価することが可能となる。

Specific content: Hypoxia response element (HRE) downstream of hypoxia response element (HRA) exists in the hypoxia response element (HRA) domain, nuclear medicine hypoxia response element (HRE) is created, and the DNA structure (HRE/hNIS) of Na+/I-cotransporter (hNIS) is created for stable introduction and transplantation of cultured cancer cells. In addition, HRE's downstream bioluminescence (Luc) gene linkage pGL4.26[HRE/Luc] was created, and cancer cell lines were transiently introduced to increase the low acid load of bioluminescence intensity. 99mTcO4-accumulation assay in vitro evaluation, stable introduction of cultured cancer cells, transplantation of cancer cells, and in vivo evaluation One side, the low acid element, the strong CAG, the downstream hNIS link, the fertilized egg, the strong CAG, the downstream hNIS link, the strong CAG, the strong CAG, the downstream hNIS link, the strong CAG, the strong CAG, the downstream hNIS link, the strong CAG, the strong CAG, the Genotyping is a negative result of the 99 mTcO4-aggregation test system. Now, the system is established, the results are improved, and the method is realized. Significance and importance: research on the relationship between transplant cancer and (1) radiation therapy resistance and hypothyroidism, and (2) research on the molecular processes involved in the activation of hypothyroidism will be developed. (1) Research on cancer induction, natural development and cancer in vivo,(2) Research on hypoacidosis and development in hemorrhagic diseases. The <18>low acid <18>PET can be evaluated in vivo by comparison with FAZA and FMISO.

项目成果

3H-FLTによる癌の分子標的療法の早期評価:胆がんマウスにおける投与量依存性の検討

使用 3H-FLT 进行癌症分子靶向治疗的早期评估：检查胆汁癌小鼠的剂量依赖性

• 发表时间: 2007
• 作者: 趙 松吉;久下裕司;趙 芫;竹井俊樹;鐘ヶ江香久子;犬伏正幸;志賀 哲;加藤千恵次;関 興一;玉木長良
• 通讯作者: 玉木長良

核医学による遺伝子治療・再生医療の評価

使用核医学评估基因治疗和再生医学

• 发表时间: 2008
• 作者: Shimizutani;T.;Harashina;S.;三尾稔;David Carballo and Claudia Garcia-Des Lauriers;中村民雄;酒井啓子;青柳みどり・鄭躍軍;池口明子;縄田浩志;犬伏正幸
• 通讯作者: 犬伏正幸

11C-CGP-12177PETで判定した心筋β受容体密度の低下と心不全の重症度との関連.

11C-CGP-12177PET 测定的心肌 β 受体密度下降与心力衰竭严重程度之间的关系。

• 发表时间: 2007
• 作者: 納谷 昌直;他
• 通讯作者: 他

Molecular Imaging in Heart Failure.

心力衰竭的分子成像。

• 发表时间: 2007
• 作者: Inubushi M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Radionuclide reporter gene imaging for cardiac gene therapy

• DOI: 10.1007/s00259-007-0438-x
• 发表时间: 2007-06-01
• 期刊: EUROPEAN JOURNAL OF NUCLEAR MEDICINE AND MOLECULAR IMAGING
• 影响因子: 9.1
• 作者: Inubushi, Masayuki;Tamaki, Nagara
• 通讯作者: Tamaki, Nagara