哺乳動物卵管の生物機能に関する基礎的研究

哺乳动物输卵管生物学功能的基础研究

• 批准号: 01480391
• 负责人: 野田 洋一
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01480391/
• 关键词: 共培養; 卵管由来細胞培養; マウス2ーCell block; 条件づけ培地; 胚・体細胞共培養; ハムスタ-卵管培養

ハムスタ-卵管由来細胞培養系の培養上澄(条件づけ培地)を作製し、胚発生促進効果が体細胞と共存しない場合にも観察されるかどうかを検討した。条件づけ培地を作製するのに体細胞の培養上澄を24,48,120時間に回収し、対照群の基本培養液(BWW+0.3%BSA)における胚発生効率を比較した。胚発生の過程は前24時間に倒立型顕微鏡にて観察し、胚盤胞率を算定した。その結果、Day5に胚盤胞に達したものは24時間の条件づけ培地では1.1%(1/91)で、その際の対照群は3.1%(3/97)であった。条件づけ培地作製に時間をかけると培養効率は低下し、48時間の条件づけ培地では4ーCell率が23.6%(21/89)で、その際の対照群40.0%(28/70)に比して有意に低値であった。この傾向は条件づけ培地作製に120時間を費やした場合もっと顕著で、条件づけ培地における4ーCell率18.5%(15/81)であり、その際の対照群も9.9%(8/81)であり、48時間および120時間の条件づけ培地、および同じ時間培養器中で経過させた対照群においても胚盤胞率は0であった。胚発生促進活性が、条件づけ培地を用いた場合には消失してしまう機序を明らかにするため新たに共培養を行った条件づけ培地を用いて胚を培養したところ、やはり胚盤胞率は0.6%(1/169)であり、また共培養した培養上澄に共培養にもちいて来た胚を隣のwellに移し培養を行った場合にも、胚盤胞率は0.6%(1/178)であった。これらの結果は共培養によって観察される胚発生促進効果が体細胞由来の極めて不安定な物質かあるいは共培養に際して胚が体細胞の極めて近くで培養される局所的環境条件を考えると、濃度依存性の極めて高い物質であると考えられる。体細胞の近傍で体細胞が消費する為に相対的に酸素分圧が低下しているか或は体細胞が培養液中のFe,Cu或はZnなどの微量金属を取り込み一種のフィルタ-効果を発揮する為ではないかと考えられた。

ハ ム ス タ - egg tube origin cell cultivation is の chengcheng (conditional づ け petty) を as し, embryo 発 gave birth to promote working fruit が somatic と coexistence し な い occasions に も 観 examine さ れ る か ど う か を beg し 検 た. Conditions づ け petty を cropping す る の に somatic の training on the clear を 24,48,120 に 収 back し, according to the group of seaborne の basic culture medium (BWW + 0.3% BSA) に お け る embryo 発 raw を sharper rate comparison し た. The first 24 hours of the embryo development process に inverted 顕 microscope にて観 to examine the embryo and the blastocyst cell rate を to determine the <s:1> た. そ の results, Day5 に blastoderm cell に da し た も の は 24 time の conditions づ け petty で は 1.1% (1/91) で, そ の interstate の polices according to the group of 3.1% (3/97) で は あ っ た. Conditions づ け に the petty cropping time を か け る と sharper rate low は し, 48 time の conditions づ け petty で は 4 ー が Cell rate 23.6% (21/89) で, そ の interstate の polices according to the group of 40.0% (28/70) に し て intentionally に low numerical で あ っ た. こ の tendency は conditions づ け に 120 the petty cropping time を や し た occasions も っ と 顕 で, conditions づ け petty に お け る 4 ー Cell rate was 18.5% (15/81) で あ り, そ の interstate の polices according to the group of 9.9% (8/81) で も あ り, 48 time お よ び 120 time の conditions づ け petty, お よ び with じ time で incubators Passing through the させた contrast group にお て て blastocyst cell rate させた 0であった. Promote active が, embryo 発 condition づ け petty を with い た occasions に は disappear し て し ま う machine sequence を Ming ら か に す る た め new た に trained を line っ た conditions づ け petty を with い て embryo を cultivate し た と こ ろ, や は り は blastoderm cell rate 0.6% (1/169) で あ り, ま た trained し た training on the clear に trained に も ち い て to た embryo を 隣 の wellに is transplanted for the を culture in った rows に に, blastocyst rate を 0.6%(1/178)であった. は こ れ ら の results develop に よ っ て 観 examine さ れ る embryo 発 gave birth to promote working fruit が somatic origin の extremely め て unrest な material か あ る い は trained に interstate し て が somatic embryo の extremely め て nearly く で cultivate さ れ る bureau environment conditions を exam え る と, concentration dependence の め て high い material で あ る と exam え ら れ る. Somatic の nearly alongside で す somatic が consumption る as に phase of seaborne に acid element points 圧 が low し て い る か or は の in somatic が cultures of Fe, Cu or は zinc な ど の trace metals を take り 込 み a の フ ィ ル タ - working fruit を 発 swing す る for で は な い か と exam え ら れ た.

项目成果

馬岡陽,野田洋一,松本央,森崇英: "“マウス前核期胚培養における酵素毒性の影響"" 日本不妊学会雑誌.

Yo Umaoka、Yoichi Noda、Naka Matsumoto、Takahide Mori：“酶毒性对小鼠原核阶段胚胎培养的影响”，日本不孕协会杂志。

馬岡陽,野田洋一,森崇英: "マウス2細胞期以後の胚発育に及ぼすSOD添加低酸素下培養の効果"" 日本不妊学会雑誌.

Yo Umaoka、Yoichi Noda、Takahide Mori：“补充 SOD 的缺氧培养对小鼠 2 细胞阶段后胚胎发育的影响”日本不孕协会杂志。

Katsuhiko NARIMOTO: "“Role of Superoxide Dismutase in the Fallopian Tubs Function:Immunohistochemical Assessment of Superoxide Dismutase in the Fallopian Tube"" Acta Histochemica cytochemica. 24:2. (1991)

Katsuhiko NARIMOTO：“超氧化物歧化酶在输卵管功能中的作用：输卵管中超氧化物歧化酶的免疫组织化学评估”《细胞化学学报》24：2。

野田洋一,成本勝彦,都倉隆,野々垣多加史,井田憲司,辰巳賢一,夏山知,岸淳二,森崇英: "胚・体細胞相互作用の解析" 日本不妊学会雑誌.

Yoichi Noda、Katsuhiko Narimoto、Takashi Tokura、Takashi Nonogaki、Kenji Ida、Kenichi Tatsumi、Satoshi Natsuyama、Junji Kishi、Takahide Mori：“胚胎-体细胞相互作用的分析”日本不孕协会杂志。

Yoichi NODA: "“Analysis of oviductーderived embryonic growth stimulator activity"" International Journal of Fertility. (1991)

Yoichi NODA：“输卵管来源的胚胎生长刺激剂活性分析”，《国际生育杂志》（1991 年）。