ヒト胃癌の進展に伴なう細胞増殖の場の変化と浸潤に関する分子病理学的研究

人胃癌进展过程中细胞增殖和侵袭变化的分子病理学研究

• 批准号: 04807023
• 负责人: 細川 洋平
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04807023/
• 关键词: ヒト胃癌; 細胞増殖; 増殖の場; 浸潤と転移; PCNA; プラスミノーゲンアクチベーター; in situ hybridization法

材料と方法:本研究を遂行するにあたり、生検された良性腺腫10例、胃癌および切除されたヒト胃癌30例のホルマリンあるいはパラホルムアルデヒドを用いた。細胞増殖能についてはPCNA、Ki-67抗原に対する抗体を用いてその陽性率を免疫組織化学的に算出し検討した。癌細胞の浸潤・転移能については、線溶活性化因子であるウロキナーゼ型プラスミノーゲンアクチベーター(u-PA)がプラスミンを介してプロコラゲナーゼを活性化し細胞外基質を溶解することで、癌の浸潤、転移に関与すると考えられているので、u-PAの局在と発現をそれぞれ免疫組識化学法およびin situ hybridization(ISH)法を用いて検討した。ISH法によるu-PA mRNAの検出にはまずプローブの作成から検討を行い、感度の高いものを得た。結果:(1)細胞増殖能の検討;PCNAあるいはKi-67免疫染色で陽性となる増殖能を有する細胞は腺腫では粘膜表層に分布密度が高く、一方癌腫では病巣全体に高い密度で分布しつつかつより深部にまで高密度で分布することが明かになった。また、粘膜下層以下に浸潤する場合、先進部の癌局所でより高い陽性率が得られた。(2)浸潤能の検討;免疫組織化学的にもISH法にてもu-PAは癌細胞の細胞質、とくに核の近傍に顆粒状に発現した。陽性細胞は一般に癌腫辺縁に多く出現した。しかしながら、マクロファージ様細胞および間質の紡錘形細胞にも時に陽性所見を得た。即ち、癌細胞自身が産生し、周囲に分泌しながら浸潤転移能を高めて行く機序が示唆された。現在、PCNAあるいはKi-67による増殖活性とu-PAによる浸潤能の二つのパラメーターを同時に観察する方法を開発中である。

Materials と methods: this study を carries out す る に あ た り, raw 検 さ れ た 10 cases of benign gland swollen, stomach お よ び excision さ れ た ヒ ト 30 cases of gastric cancer の ホ ル マ リ ン あ る い は パ ラ ホ ル ム ア ル デ ヒ ド を with い た. Cells raised colonization に つ い て は PCNA and Ki - 67 antigen に す seaborne を る antibody with い て そ の positive rate of を immunohistochemical に calculate し beg し 検 た. Cancer cells の infiltration, planning to move to に つ い て は, line soluble active factor で あ る ウ ロ キ ナ ー ゼ type プ ラ ス ミ ノ ー ゲ ン ア ク チ ベ ー タ ー (u - PA) が プ ラ ス ミ ン を interface し て プ ロ コ ラ ゲ ナ ー ゼ を activeness し extracellular matrix を dissolved す る こ と で, の infiltrating, planning to move に masato and す る と exam え ら れ て い る の で, u - PA の innings in と, をそれぞれ immunohistochemistry method およびin situ hybridization(ISH) method を use て検 て検 to address た た. ISH method に よ る u - PA mRNA の 検 out に は ま ず プ ロ ー ブ の made か ら beg を 検 の high い い, sensitivity も の を た. Result :(1) Cell proliferative capacity 検 検; PCNA あ る い は Ki - 67 positive immune dyeing で と な る raised colonization can have す を は る cells swollen glands で は mucosal surface に distribution density high が く, a cancer で は disease 巣 all で に い high density distribution し つ つ か つ よ り deep に ま で high density distribution で す る こ と が Ming か に な っ た. Youdaoplaceholder0, in cases of に infiltration below the submucosa, する, and in advanced cancer sites, でよ with a relatively high <s:1> positive rate が and られた. (2) Infiltration energy 検 attacks; The に に ISH method of immunohistochemistry にて <s:1> u-PA affects the <s:1> cytoplasm and とくに nucleus of cancer cells, where に granular に are present た た. Positive cells are usually に, cancerous 辺 is mostly に, く appears, た. The に ながら and ロファ ロファ ロファ ジ sample cells および interstitial <s:1> spindle-shaped cells に に are found to be に positive and を is た. ち, cancer-cell が し, weeks 囲 に secretion し な が ら infiltrating planning can move を high め て line く machine sequence が in stopping さ れ た. Now, PCNA あ る い は Ki - 67 に よ る raised colonization activities と u - PA に よ る can infiltrate の two つ の パ ラ メ ー タ ー を simultaneously に 観 examine す る method を open 発 で あ る.

项目成果

細川 洋平 (分担執筆): "培養細胞研究法" 医学書院, (1993)

细川洋平（撰稿人）：“培养细胞研究方法” Igakushoin，（1993）

K.Nonomura: "Localization of transglutamiuate 1 mRNA in normal and psoriatic epidevmis by non-radioactive in situ hybridizasion" British Journal of Dermatology. 128. 23-28 (1993)

K.Nonomura：“通过非放射性原位杂交对正常和银屑病表皮中转谷氨酸 1 mRNA 进行定位”《英国皮肤病学杂志》。

R.Kushima: "Cell proniferation and deffereutiation in the non-neeplastic mucosa and intramucetal carairoma of the numan stomach by mucin-histoclemistry and RCNA immurolvsto chemistry" Pdoceedings of Japanses Reseauch Society for gastroentorobgical caiunog

R.Kushima：“通过粘蛋白组织学和 RCNA 免疫化学对人胃的非肿瘤性粘膜和粘膜内癌进行细胞增殖和脱脂”，日本胃肠病学研究会论文集

M.Ohmura: "DNA plerdy pattern and oncogeue expression of colorectal tumors." Abstracts of 19th International Congress of International Academy of Pathology. 102- (1992)

M.Ohmura：“结直肠肿瘤的 DNA Plerdy 模式和癌基因表达。”

西村 和彦: "PCNA免疫組織化学によるヒト大腸腫瘍の進展に伴う細胞増殖と増殖の場の変化の検討" 日本消化器病学会誌. 90. (1993)

Kazuhiko Nishimura：“使用 PCNA 免疫组织化学检查与人类结肠肿瘤进展相关的细胞增殖和增殖场的变化”，日本胃肠病学会杂志 90。（1993）。