权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

生合成における酵素的Diels-Alder反応-----その証明と反応機構

生物合成中的酶促Diels-Alder反应----证明及反应机理

基本信息

批准号：
05660113
负责人：
及川英秋
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1994
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05660113/
关键词：
Diels-Alder反応生合成 solanapyrone A

项目摘要

Diels-Alder反応は非触媒的に基底状態で起こることが知られ、軌道対称性保存則に従い高い立体選択性を示すため、天然物全合成において多用される反応の一つである。近年、[4+2]付加反応(Diels-Alder反応)により、生合成されたと予想される天然有機化合物が数多く見い出されてきているが、生体内(酵素)反応の実在することを証明した例はない。今回生体反応としては未だ例のない新しい型の炭素-炭素結合形成反応である本反応が実在することを証明するため、植物毒素solanapyrone A(1)を対象として選び研究を行った。重水素標識した仮想前駆体2の短段階合成経路を確立した。さらに標識化合物の菌への取り込み実験により直鎖状トリエンが実際にsolanapyrone A(1)に変換されることを確認するとともに、標識された1に光学活性なアシル基を導入し、一方のジアステレオマーにのみ重水素が保持されることを^2H-NMRにより確認した。これにより本環化は非酵素的に起きているのではなく、酵素的[4+2]付加環化反応により進行することを明かにし、Diels-Alder反応が生合成に関与することを世界で始めて立証することができた。また無細胞系で酵素活性を検出するためのHPLCを用いた検定法を確立できた。これにより20ug/mlと微量の1を検出することが可能となった。

Diels-Alder reaction is a non-catalytic reaction. It is known that the orbital symmetry is preserved, and the stereoselectivity is high. It is a reaction to the synthesis of natural substances. In recent years,[4+2] Diels-Alder reaction has been proved to exist in many natural organic compounds. A new type of carbon-carbon bond is formed in the reaction system. The short-term synthesis pathway of the heavy halogen precursor 2 is established. In addition, the identification of the compound was confirmed by 2H-NMR. The identification of the compound was confirmed by 2H-NMR. The [4+2] addition of cyclization to the reaction system of this enzyme is a step forward in the process of synthesis. The enzyme activity of the cell line was detected by HPLC. A small amount of 20ug/ml is required.