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赤血球膜陽イオン輸送系変異への細胞内情報伝達系の関与

细胞内信号转导系统参与红细胞膜阳离子转运系统突变

基本信息

批准号：
05660360
负责人：
藤瀬浩
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Azabu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

I.HK犬赤血球C1依存性K輸送と細胞内情報伝達系の関与について。P1レセプターアゴニストであるアデノシン誘導体は、本輸送活性を抑制し、AMP、cAMPは本輸送を活性化させた。したがって、アデニレートシクラーゼにより産生されたcAMPは、本輸送活性を亢進するが、それは、P1レセプターにより抑制される。ホスファターゼ阻害剤であるオカダ酸は、10オMで本輸送活性を完全に阻害し、ホスファターゼ1(P1)が本輸送を活性化することが推察された。また1nMオカダ酸は本輸送活性を20%増加させ、ホスファターゼ2Aが本輸送活性抑制に働くことが示唆された。細胞内2価陽イオンの枯渇により、本輸送は亢進したが、羊赤血球とは異なり、Mg詰め込みの影響は不完全であった。正常価の5倍のMg濃度でも、対照と輸送活性は同じであり、輸送活性を抑制している。2価陽イオンはMgではないことが示唆された。II.ホフマイスター順列陰イオンのNa、K-ポンプへの影響。溶液の陰イオンがNO_3ではClに比べ、Na、K-ポンプ活性が高かった。他の陰イオンを調べると、chaotropesなイオンほど本ポンプ活性を亢進させた。速度論的解析では、NO_3によりVmaxが1.6倍上昇し、Kmが77%減少し、chaotropesなイオン環境は本ポンプへの基質結合の親和性を高めることが示された。細胞内陰イオンにより、ポンプ蛋白の構造が変化し、本ポンプ活性に影響することが示唆された。III.輸送体の精製HK、LK赤血球ゴーストを用い、各赤血球膜の抗体を調製するための抗血清を作成した。ハイブリダイゼーション装置を用いて赤血球へのゴースト抽出物の埋め込み条件を検討中である。

I.HK Erythrocyte C1-dependent K transport and intracellular information transmission system. P1 is the most potent inhibitor of intracellular transport activity, and AMP and cAMP are also active. The production of cAMP and the enhancement of cellular transport activity are inhibited by the presence of P1. 10 ° M for the transport activity. 10 ° M for the transport activity. 10 ° M for the transport activity. 1nM of the acid transport activity increased by 20%, and 2 nM of the acid transport activity decreased by 20%. 2. In the cell, there is no change in the expression of the gene, and there is no change in the expression of the gene. 5 times the normal Mg concentration, the transport activity is inhibited. 2. II. The influence of Na, K-complex on the structure of the complex. The activity of NO_3 is higher than that of Cl, Na and K. He is a member of the Association for the Advancement of Women. The analysis of velocity theory shows that NO_3 increases Vmax by 1.6 times, Km decreases by 77%, and the affinity for matrix binding of chaotropes increases. Changes in the structure and activity of intracellular proteins III. Preparation of antiserum for purification of HK and LK erythrocytes The conditions for the extraction of red blood cells are discussed.