权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

先天性腎性尿崩症におけるバゾプレシンV2受容体の遺伝子解析-障害部位の確定と臓器特異性に関する検討

先天性肾性尿崩症加压素V2受体基因分析-病变部位确定及器官特异性检查

基本信息

批准号：
05670676
负责人：
大関武彦
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1995
项目状态：
已结题

项目摘要

先天性腎性尿崩症例につき、腎尿細管のV2受容体系の障害部位の検討および遺伝子解析を行った。症例1,2の伝達様式は常染色体優性と考えられた。また後述するcAMPの反応性の検討からも、腎性尿崩症の中で過半を占める1型ではなく2型と考えられた。対照として4例の先天性腎性尿崩症1型の症例についても、病変部位の確認を行った。尿中cyclic AMP濃度は、ラジオイムノアッセイにて、血液凝固第8因子は発色性APTT法にて、von Willebrand因子活性は固定血小板凝集法にて測定した。DNAの抽出はJeanpierre(1987)により報告された方法を改変しておこなった。HindIII,BamHIにて消化したDNAに対し、Lolaitらの方法も参考にしつつ、Southern blot法にて検討を加えた。32-Pで標識されたヒトV2受容体cDNAの428bp fragmentをprobeとした。PCRにおけるプライマーはV2受容体の4-6domainをコードする332bp fragmentに対するものである。症例1においては、DDAVP投与後に尿中cAMP濃度は609%であり、症例2では前値の1984%まで増加し、120分後には96%ほぼ前値に類似した値にまで再度低下した。これらの結果はこの2症例において、protein kinase Aやwater channelの異常が存在している可能性を考えさせる結果であった。対照の4例においてはこれと異なり、78%-126%と有意の上昇を示さず、遺伝形式も伴性劣性であり、DDAVP投与に対する凝固因子の増加反応が不十分な例もあった。症例1、2について遺伝子解析を試みたが、既知のV2受容体遺伝子の異常は存在しないことが確認された。このことから本症2型においてはV2受容体系の後半部に障害部位があることが示唆された。それが最近クローニングされたaquaporin-2ないしそれ以外の異常であるかの研究は、腎性尿崩症の病因解明のみならず、aquaporin-2を含む腎集合管の水濃縮機構をより明らかにするためにも、重要な意義のあるものと考えられる。

Congenital diabetes insipidus cases, renal tubule V2 receptor system damage site analysis and genetic analysis Case 1 and 2: A study of autosomal dominance. The reverse expression of cAMP was observed in type 1 and type 2 diabetes mellitus. 4 cases of congenital renal diabetes insipidus type 1 were studied. Cyclic-AMP concentration in urine was measured by APTT, von Willebrand factor activity and fixed platelet aggregation. DNA Extraction by Jeanpierre(1987) HindIII,BamHI, DNA digestion, Lolait, reference, Southern blot The 32-P marker is a 428bp fragment of the V2 receptor cDNA. PCR is a 332bp fragment of the 4- 6 domain of the V2 receptor. In case 1, the cAMP concentration in urine increased by 60.9% after administration of DDAVP, and in case 2, the cAMP concentration increased by 19.84% after administration of DDAVP, and decreased by 9.6% after administration of DDAVP. The results of these two cases show that protein kinase A and water channel abnormalities exist. 4 of the cases showed significant differences, 78%-126%, intentional increase, negative correlation, DDAVP, and increased coagulation factor. In case 1 and 2, we try to analyze the gene, and confirm the existence of the abnormal gene of V2 receptor. The second half of the V2 receptor system was damaged. Recent studies on the etiology of renal diabetes insipidus, including aquaporin-2, and water concentration mechanisms containing renal collecting ducts, have shown that aquaporin-2 is an important component of renal diabetes insipidus.