視床下部神経内分泌系を統御する神経機構の電顕免疫組織化学的研究

控制下丘脑神经内分泌系统的神经机制的电镜免疫组织化学研究

• 批准号: 05680660
• 负责人: 久野 節二
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680660/
• 关键词: 視床下部; 神経内分泌; 免疫組織化学; シナプス性制御

本研究では、当初の計画通り副腎皮質調節系と甲状腺調節系、及び成長ホルモン分泌系と甲状腺調節系に関して、包埋前二重免疫染色法により副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン(CRF)、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(TRH)、ソマトスタチン(SS)についてCRF細胞-TRH細胞、TRH細胞-SS細胞間でのシナプス相関について研究を行うと共に、オキシトシン(OT)細胞とSS細胞に関する観察を加えた。1 方法 (1)標本作成 コルヒチン処理SD系成熟雄ラットを、麻酔下にザンボニ変法液(pH7.4)で灌流し、視床下部の前頭断ビブラトーム切片を作成した。(2)特異抗血清作成 抗原として用いるペプチドホルモンを合成し、牛血清アルブミンとの結合物を抗原として兎に免疫し、各特異抗血清を得た。(3)免疫染色アビジン-ビオチン-ペルオキシダーゼ複合体を用いて、2種類のペプチドをベンジジンと銀粒子により分別標識して電顕観察した。2 成果 室傍核小細胞領域において、CRF細胞に対しTRH線維がシナプス結合を形成し、さらにTRH細胞にはCRF線維がシナプス結合を形成する相互性神経支配を認めた。一方、TRH細胞とSS細胞の二重免疫染色では、TRH細胞へのSS線維支配は観察されたが、SS細胞に対するTRH線維のシナプス形成は観察されなかった。室傍核大細胞領域ではOT細胞へのSS線維のシナプス結合を認めた。3 考察 本研究から異なるペプチドホルモン免疫陽性細胞の間にシナプス性神経連絡の存在が明らかになった。おそらくこのようなシナプス結合は各ホルモン分泌を相互調節するための室傍核に内在する神経性統御機構を示しているのではないかと考えられる。

This study was conducted to investigate the relationship between adrenal cortex regulatory system and thyroid regulatory system, and growth hormone secretion system and thyroid regulatory system. Pre-embedding double immunostaining method was used to investigate the relationship between adrenal cortex stimulating hormone release (CRF), thyroid stimulating hormone release (TRH), thyroid hormone release (SS) and CRF cells-TRH cells, TRH cells-SS cells. Ot cells were detected. 1. Method (1) Preparation of the SD system mature male and female parts of SD (2)Specific antisera are prepared from bovine serum and its conjugates. (3)Immunostaining: two kinds of immunostaining and silver particle immunostaining 2. The interaction between CRF cells and TRH cells in the nuclear domain is recognized. Double immunostaining of TRH cells and SS cells was used to detect the expression of TRH cells and SS cells. In the field of large cells near the nucleus, OT cells are connected to SS lines. 3. To investigate the existence of heterosexual neurocommunication in immunopositive cells. The internal control mechanism of each cell is regulated by the internal control mechanism.

项目成果

Hisano Setsuji: "Reciprocal synaptic relations between CRF-immunoreactive- and TRH-immunoreactive neurons in the paraventricular nucleus of the rat hypothalamus" Brain Res. 620. 343-346 (1993)

Hisano Setsuji：“大鼠下丘脑室旁核中 CRF 免疫反应性和 TRH 免疫反应性神经元之间的相互突触关系”Brain Res。

Hisano Setsuji: "Somatostatin-like immunoreactive axon terminals on oxytocin-like immunoreactive neurons in the paraventricular nucleus of the rat hypothalamus" Neurosci Lett. 156. 21-23 (1993)

Hisano Setsuji：“大鼠下丘脑室旁核中催产素样免疫反应性神经元上的生长抑素样免疫反应性轴突末端”Neurosci Lett。

Kitagawa Kouki: "Solid-phase synthesis of cionin,a protochordate-derived octapeptide related to the gastrin/cholecystokinin family of peptides,and its mon-tyrosine-sulfate-containing derivatives" Int J Peptide Protein Res. 43. 190-200 (1994)

Kitakawa Kouki：“cionin 的固相合成，cionin 是一种与胃泌素/胆囊收缩素肽家族相关的原索动物衍生的八肽，及其含单酪氨酸硫酸盐的衍生物”Int J 肽蛋白研究。