化膿連鎖球菌感染における皮膚・表皮細胞レセプターの解析

化脓性链球菌感染中皮肤和表皮细胞受体的分析

• 批准号: 07670301
• 负责人: 岡田 信彦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670301/
• 关键词: 細菌感染症; 菌・宿主相互作用; 付着因子; トランスジェニック・マウス

化膿連鎖球菌(A群連鎖球菌、Streptococcus pyogenes)は菌体表層に発現するM蛋白により皮膚・表皮細胞上のmembrane cofactor protein (MCPあるいはCD46)に特異的に結合する。本研究では、M蛋白とMCPの相互作用に必要な最小領域を同定すること、さらにMCPを発現するトランスジェニックマウスを作製し、化膿連鎖球菌による個体レベルでの実験感染モデルを確立することを目的とした。MCPは、N末端側にshort consensus repeat(SCR)と呼ばれる約60アミノ酸からなる4つのくり返し配列をもつ膜蛋白で、MCPの生理学的活性部位はこの4つのSCR上にあることがわかっている。M蛋白との結合部位もこれまでの知見からSCR上に存在すると考えられている。今回、クローン化されたMCPcDNA(クローンK5-23)から異なるSCR数を含む8つの部分断片を大腸菌内で発現させ、これを精製した。一方、化膿連鎖球菌は表皮細胞由来の培養細胞(HaCat細胞)に対してM蛋白とMCPの相互作用により結合することがわかっている。この培養細胞を用いて、MCP精製部分蛋白による菌の細胞への結合阻害をELISA法により調べた結果、すくなくとも細胞表面に露出するMCP分子のSCR2からSCR4までの領域が菌との結合に必要であることが明らかになった。さらに、クローン化されたMCPcDNAを用いて、MCP発現トランスジェニックマウスの作製を試みた。近交系マウスC3H/HeNを親株とするMCP発現トランスジェニックマウス10匹を得、このMCP発現トランスジェニックマウスを用いて化膿連鎖球菌の感染の有無および感染経路のちがいによる病態の変化などを個体レベルで検討することが可能となった。

The combination of membrane cofactor protein (MCP protein CD46) on the epidermis of Streptococcus mutans (Group A, Streptococcus pyogenes) was detected on the surface of the bacteria. In this study, the interaction between M protein and MCP is necessary. The minimum domain is the same as that in the same domain. In this study, the interaction between M protein and M protein is necessary in this study. In this study, it is necessary to determine the minimum domain of the interaction between M protein and M protein in this study. MCP, N-terminal short consensus repeat (SCR), total DNA (60%), membrane protein (MIP), active site of physiology (MCP), membrane protein (membrane protein), active site (SCR). At the binding site of M protein, it is known that there is a positive reaction on the SCR of M protein. This time, it is necessary to change the number of MCPcDNA (from K5-23 to K5-23). The number of SCR contains "8", and some fragments are known to be present and refined. On the one hand, the origin of the epidermis cells of Streptococcus chemisis (HaCat cells), the interaction of M protein and MCP, the combination of bacteria, the epidermis cells, the epidermal cells, the The results of ELISA assay were used to detect the presence of MCP molecules on the surface of the cells, and the SCR2 molecules were detected in the field of bacteria in the field of bacterial culture. The results of ELISA assay showed that the cell surface of the cells was exposed by the combination of SCR2 and DNA. Please make sure that the MCPcDNA is used, and the MCP will show that you are not going to make an attempt. The inbred line was infected with C3H/HeN. The inbred line was infected with bacteria. The inbred line was infected with cocci. The inbred line was infected with bacteria. The inbred line was infected with bacteria. The disease was caused by infection. The disease was caused by the infection of the virus.