Crohn病腸粘膜T細胞レセプター遺伝子の塩基配列決定とSCIDモデルマウスの作成

克罗恩病肠粘膜T细胞受体基因测序及SCID模型小鼠的制作

• 批准号: 07670587
• 负责人: 中村 秀次
• 金额: --
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07670587/
• 关键词: 炎症性腸疾患; クローン病; T細胞レパトア; SCIDマウス

(1)クローン病腸粘膜T細胞レセプター遺伝子のclonalityの検討:クローン病患者の腸粘膜で、病変部・非病変部を問わず高率に発現しているVβ2,12,13T細胞はoligoclonalで、各ファミリーとも数個の限定されたcloneの増加が認められ、何らかの抗原に対して、数個の特定cloneが反応していることが示唆された。そこで、これらの限定されたcloneの増加が、特異的なものか否かをさらに検討した。各症例の小腸・大腸間のcloneを比較したところ、同一症例では小腸でも大腸でも増加しているcloneは同じであった。正常コントロール群でも各ファミリーはoligoclonalであるが、増加しているcloneの数は多く、同一ドナーでの小腸・大腸間のcloneは異なることより、クローン病では数種の特定T細胞cloneが、病因に関与しているものと思われた。また、同じVβファミリーが増加することより、当初Superantigenの関与も疑われたが、各症例間の限定されたcloneは異なり、MHC拘束性を有すると考えられることから、これらはConventional antigenの関与を示唆するものと思われた。(2)増加しているT細胞cloneの由来の検討:上記解析は、分離・培養による修飾を避けるため、直接腸粘膜生検から抽出したRNAを材料としたが、上皮細胞間リンパ球と粘膜固有層リンパ球に分けて解析したところ、限定された数個のcloneは後者に存在する傾向にあった。(3)Crohn病患者T細胞のSCIDマウスへの移入実験:(i)放射線照射した抗原提示細胞と患者腸粘膜抽出物とで培養した患者末梢血リンパ球、(ii)Superantigenで人工的にVβ2,12,13T細胞を増やした患者末梢血リンパ球、(iii)患者腸粘膜固有層リンパ球をSCIDマウスに移入しヒトCrohn病のモデルを作る試みは現在進行中である。(4)in situ hybridizationによるサイトカインの局在:クローン病腸粘膜病変部炎症細胞にTNFαmRNAの強い発現がみられ、抗TNFα抗体の有効性の報告からも病変の増悪に関与するものと思われた。ただ同じ炎症性サイトカインでもIL-6は腸管漿膜側の血管内皮細胞に強い発現がみられることから、病変形成に2つのサイトカインの異なった関与が示唆された。

(1) ク ロ ー ン disease intestinal mucosa t-cell レ セ プ タ ー posthumous son 伝 の clonality の beg: 検 ク ロ ー ン patients の intestinal mucosa で, disease - · the disease - ask を わ ず high rate に 発 now し て い る V beta 2,12,13 t-cell は oligoclonal で, various フ ァ ミ リ ー と も several の qualified さ れ た clone の rights が recognize め ら れ, ら か の antigen に し seaborne て, several specific clone の が anti 応 し て い る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0 で で, れら れら, された limited, されたclone, が add が, special, な <e:1>, <s:1> な no, をさらに検 をさらに検 ask for た. の small intestine, large intestine disease patients between の clone を compare し た と こ ろ two cases, the same で は small intestine で も e. で も raised plus し て い る clone は with じ で あ っ た. Normal コ ン ト ロ ー ル group で も each フ ァ ミ リ ー は oligoclonal で あ る が, rights and し て い る clone の number は く, same ド more ナ ー で の between the small intestine, large intestine の clone は different な る こ と よ り, ク ロ ー ン disease で は several specific T cell clone の が, causes に masato and し て い る も の と think わ れ た. ま た, with じ V beta フ ァ ミ リ ー が raised plus す る こ と よ り, original Superantigen の masato and も suspected わ れ た が, between different cases の qualified さ れ た clone は different な り, MHC at を have す る と exam え ら れ る こ と か ら, こ れ ら は but antigen を is related to を, する, <s:1>, と and われた. (2) rights and し て い る T cell clone の origin の 検 beg: written resolution は, isolation, culture に よ る modified を avoid け る た め, intestinal mucosa directly 検 か ら spare し た RNA を material と し た が, epithelial cells リ ン パ ball と mucosa lamina propria リ ン パ ball に points け て parsing し た と こ ろ, qualified さ れ た several の clone は latter に deposit Tend to にあった at する. Crohn disease (3) T cells の SCID マ ウ ス へ の to be 験 : (I) radiation し た antigen tip cells と intestinal mucosa in patients with extract と で cultivate し た リ patients peripheral blood ン パ ball, (ii) Superantigen で artificial に V beta 2,12,13 T cells を raised や し た リ patients peripheral blood ン パ ball, (I Ii) in patients with intestinal mucosa lamina propria リ ン パ ball を SCID マ ウ ス に move し ヒ ト Crohn disease の モ デ ル を try make る み は now underway で あ る. (4) the in situ hybridization に よ る サ イ ト カ イ ン の bureau in: ク ロ ー ン disease intestinal mucosa disease - department of inflammatory cells に TNF alpha mRNA の strong い 発 now が み ら れ, anti TNF alpha antibody の have sharper の report か ら も disease - の raised 悪 に masato and す る も の と think わ れ た. た だ with じ inflammatory サ イ ト カ イ ン で も IL - 6 は insufflate serous side の endothelial cells に strong い 発 now が み ら れ る こ と か ら, illness - form 2 つ に の サ イ ト カ イ ン の different な っ た masato and が in stopping さ れ た.

项目成果

小川 弘之 他: "クローン病腸粘膜におけるT細胞受容体Vβレパトアの解析" 消化器と免疫. 29. 106-111 (1994)

Hiroyuki Okawa 等人：“克罗恩病肠粘膜中 T 细胞受体 Vβ 的分析”《胃肠病学和免疫学》29. 106-111 (1994)。

木村 良博 他: "自己免疫性腸炎" 別冊 医学のあゆみ 免疫疾患. 339-341 (1995)

Yoshihiro Kimura 等：“自身免疫性肠炎”单独卷《医学免疫疾病史》339-341 (1995)。

小川 弘之 他: "Crohn病腸粘膜におけるT細胞受容体Vβレパトアの解析" 日本臨床免疫学会誌. 17. 842-846 (1994)

Hiroyuki Okawa 等：“克罗恩病肠粘膜中 T 细胞受体 Vβ 的分析”日本临床免疫学会杂志 17. 842-846 (1994)。