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自家組織由来遺伝子導入培養細胞の脳内移植による神経疾患治療の試み

尝试通过自体组织来源的基因转移培养细胞脑内移植治疗神经系统疾病

基本信息

批准号：
07807131
负责人：
磯野光夫
金额：
$ 0.96万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07807131/
关键词：
脳神経移植エンドハフィン疼痛遺伝子操作

项目摘要

ラットを用いた自家培養細胞の作成:正常ラットを用い,自家組織よりの細胞系列(線維芽細胞,横紋筋細胞,シュワン細胞)を作成し,これを同系のラットに移植,どの種類の細胞系列が移植細胞として適しているかを検討した.その結果,移植後の増殖度,長期生存に関しては,シュワン細胞が適していたが,細胞系列の作成の難易度からみると,線維芽細胞,横紋筋細胞の方が容易であった.自家培養細胞への遺伝子導入:上記の3種類の細胞に,増殖力を増すためのc-fosのcDNA,分泌を目的とするオピエイト(β-エンドルフィン)のcDNA,更にこれらの上流に位置しステロイドに反応し発現を調節するプロモーター遺伝子を導入する操作を行なった.なおプロモーターは従来より我々が使用していたメタロチオネインに換えて,より臨床的に使いやすいMMTVを用いた.これらの細胞の,in vitroにおける動態,β-エンドルフィンの分泌能及びそのステロイド投与による調節具合を検討した.その結果,RT-PCR法などにて,細胞自体の中でのステロイド投与によるβ-エンドルフィンの発現調節は可能であったが,培養液の検索で得られた細胞外への分泌は軽度であった.これは,細胞の性質によりβ-エンドルフィンの分泌に問題があるのか,または組み込んだβ-エンドルフィンのDNAの問題か検討を要する.そのため,現在PC12細胞など別の性質の細胞に同様の遺伝子操作を行ない検討中である.そのため,疼痛モデルラットにおける検討は今後の課題である.

The cell culture system of the cell culture system is composed of normal cells, cell culture systems of the cell culture system. The results show that the proliferation after transplantation, the long-term survival, the difficulty of cell series formation, the difficulty of cell proliferation, and the difficulty of cell proliferation. Gene introduction into self-cultured cells: c-fos cDNA, c-fos cDNA. For example, if you want to use MMTV, you can use MMTV. In vitro, the secretion of β-glucagon and the regulation of β-glucagon are discussed. As a result,RT-PCR method was used to detect the expression and regulation of β-deoxynucleotides in cells, and the secretion of extracellular DNA was detected in culture medium. This is a question of cell properties and secretion of β-deoxyribonucleic acid. PC-12 cells are now operating in different cell types. The problem of pain and pain in the future.