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血管平滑筋細胞内Ca貯蔵部に発見された電位感受性Ca放出現象の細胞生理学的研究

血管平滑肌细胞内Ca储存区发现的电压敏感Ca释放现象的细胞生理研究

基本信息

批准号：
07833009
负责人：
山本博道
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ラット大動脈初代培養平滑筋細胞をサポニン処理し、Ca-45を用いてATP依存性Ca貯蔵部からのCa流出を測定した。2.スキンド細胞用緩衝液中の130mM KClをLiCl、Tris・HCl、NH4Cl、塩化コリン、Sucrose等で等張性に置換すると、Ca-45流出率は増加したが、RbCl、CsCl、NaClの場合は変化しなかった。Valinomycinはこの反応を抑制または修飾した。以上の結果から、貯蔵部膜上に電位感受性Ca遊離チャンネルが存在しそれが開口された可能性が示唆された。3.KClを上記1価陽イオンまたはSucroseにて置換し、イノシトール三燐酸(IP3)によるCa遊離に対する効果をみた。無カルシウム緩衝液と300nMCa存在下の二つの条件について検討した。置換後の膜電位変化がIP3誘発Ca遊離を抑制する程度から、逆に膜電位変化の大きさ、さらに各1価陽イオンの相対的膜透過性順位を推定できた。4. Valinomycin処理は300μMCa存在下のIP3によるCa遊離に影響しなかった。Valinomycin処理はKCl/塩化アンモニウム置換によるCa-45流出率の一過性上昇を抑制し、300μMCaの存在下のIP3によるCa遊離を増加させた。Sucroseや塩化コリンへの置換の場合は影響を受けなかった。5.いくつかのカリウムチャンネルブロッカーは塩化アンモニウム置換によるCa遊離を抑制したが、IP3によるCa遊離隔には影響しなかった。KCl/塩化アンモニウム置換により誘発されるCa遊離が貯蔵部膜のK透過性の変化に影響されるものであり、IP3感受性Ca遊離チャンネルを介するものではないことが示唆された。6.以上の結果から、ラット大動脈中膜由来初代培養平滑筋細胞の細胞内Ca貯蔵部には電位感受性Ca遊離機構が存在し、IP3感受性Ca遊離機構とは異なる可能性が示唆された。

1. Ca-45-dependent Ca storage and Ca efflux in primary cultured smooth muscle cells were measured. 2. The efflux rate of Ca-45 increased when 130mM KCl, Tris·HCl, NH4Cl, Sucrose, etc. were replaced in the buffer solution for cells. Valinomycin is an anti-inflammatory agent. As a result, the potential-sensitive Ca ions on the membrane of the storage part exist and the possibility of opening is indicated. 3. KCl is the most important factor in the formation of Ca free radicals. In the presence of a buffer solution of 300nMCa, two conditions are required for detection. The degree of inhibition of IP3-induced Ca dissociation after substitution is determined by the order of membrane permeability of each phase of IP3-induced Ca dissociation. 4. Valinomycin treatment had no effect on Ca free in the presence of 300μ M Ca. Valinomycin treatment inhibited the transient increase of Ca-45 efflux in the presence of KCl/NH3 and increased Ca-45 free in the presence of 300μ M Ca. Sucrose's transformation and replacement are affected by the changes in the environment. 5. Ca ~(2 +) is inhibited by IP3 and Ca ~(2 +) is inhibited by IP3. KCl/Ca2 + ion exchange mechanism induces Ca free ion exchange mechanism and changes K permeability of storage membrane. 6. The above results indicate the possibility of the existence of potential-sensitive Ca ~(2 +) free mechanism and the existence of IP3-sensitive Ca ~(2 +) free mechanism in the intracellular Ca storage part of primary cultured smooth muscle cells.