モノクローナル抗体を反応場として用いた天然抗がん剤の新規合成法の開発

以单克隆抗体为反应场开发天然抗癌药物新合成方法

• 批准号: 14655343
• 负责人: 上里 新一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kansai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14655343/
• 关键词: 抗ビンブラスチンモノクローナル抗体; 抗タキソールモノクローナル抗体; ビンブラスチン; タキソール; 反応場; 立体選択的合成; anhydrovinblastine; dihydropyridinium中間体; モノクローナル抗体; ビンドリン; カサランチン; Baccatin III; 立体選択的反応

1.モノクローナル抗体を反応場とする抗腫瘍剤vinblastine(VLB)の立体並びに位置選択的合成抗VLBモノクローナル抗体IgG1(Mab-10-A9)をBalb/cヌードマウス腹腔内で培養して、大量のMAb-10-A9を得た。一方、GIT+10%FBS+1%P.S.培地を用いて、細胞培養器にて目的の抗体を大量に生産することにも成功した。前年度に、二量体性アルカロイドanhydroVLBを出発物質として、前記抗体の存在下、酸素及びNaBH_3CNと反応させ、最高82.2%の変換率で立体選択的並びに位置選択的にVLBを合成することに成功した。しかし、この条件は、反応の再現性、スケールアップ、に問題があった。そこで、不安定な反応中間体dihydropyridinium中間体を、vindolineとcatharanthineから、既報の光反応によって合成し、これを出発化合物として、抗体反応を行った。その結果、還元剤として、NADH、Na_2S_2O_4を用いることによって高収率でVLBを得ることができた。この結果の一部は、特許に実施例追加として記載した。2.抗taxolモノクローナル抗体を反応場とする抗腫瘍剤taxolの合成2-succinyltaxol-TGを抗原としてDDYマウスに免疫させ、抗体価の高い抗taxolモノクローナル抗体産生細胞株MAT-01-G12を1種類得た。しかし、残念ながら、液体窒素による凍結保存、培養、継代の操作中に抗体価が著しく低下してしまった。その原因を目下調査中であるが、ハイブリドーマのクローニングが未完了であったか、凍結保存、継代中に細胞が変異した可能性などが考えられる。今後、2-succinyltaxol-TGの他、新規構造の抗原を合成し、新たに抗taxolモノクローナル抗体を作製する予定である。

1. モ ノ ク ロ ー ナ を ル antibodies against 応 field と す る resistance swollen sores tonic vinblastine (VLB) の stereo and び に position sentaku synthetic resistance VLB モ ノ ク ロ ー ナ IgG1 ル antibody (Mab - 10 - A9) を Balb/c ヌ ー ド マ ウ ス intra-abdominal で cultivate し て, massive の Mab - 10 - A9 を た. Party, GIT + 10% FBS + 1% P.S. petty を with い て, cell culture に て purpose を large に の antibody production す る こ と に も successful し た. Before the annual に, 2 quantity body ア ル カ ロ イ ド anhydroVLB を と 発 substance し て, former record, acid in the presence of antibodies の element and び NaBH_3CN と anti 応 さ せ, up to 82.2% の で stereo sentaku variations change rate and び に position sentaku に VLB を synthetic す る こ と に success し た. <s:1> に <s:1>, <s:1> <s:1> condition, inverse 応 <s:1> reproducibility, スケ 応 アップ アップ アップ アップ, に problem があった. そ こ で, unrest な 応 intermediates を dihydropyridinium intermediates, vindoline と catharanthine か ら, both reported の light 応 に よ っ て synthetic し, こ れ を 発 compounds と し て, antibodies against 応 を line っ た. そ の results, also tonic と し て, NADH, Na_2S_2O_4 を with い る こ と に よ っ て high 収 rate で VLB を must る こ と が で き た. The <s:1> result <e:1> a と, a special に practice example is added to the と て て record <s:1> た. 2. Resistance to taxol モ ノ ク ロ ー ナ を ル antibodies against 応 field と す る resistance swollen sores tonic taxol の synthesis of 2 - succinyltaxol - TG を antigen と し て DDY マ ウ ス に immune さ せ, antibody 価 の い high taxol resistance モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody generation cell lines MAT - 01 - a G12 を た 1 species. <s:1>, residual ながら, liquid nitrogen による freezing preservation, culture, 継 generation <s:1> operation に antibody 価が, く low, て, まった. そ の reason を under investigation で あ る が, ハ イ ブ リ ド ー マ の ク ロ ー ニ ン グ が the unfinished で あ っ た か, frozen storage, 継 に cells が - different し た possibility な ど が exam え ら れ る. In the future, 2 - succinyltaxol - TG の he, new rules structure の antigen し を synthesis, new た に taxol resistance モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody を cropping す る designated で あ る.

项目成果

有機化合物の製造方法およびそれに用いる抗体

有机化合物的制造方法及其中使用的抗体

• 发表时间: 2005