インヒビンレセプターの同定とシグナル伝達に関する研究

抑制素受体的鉴定及信号转导研究

• 批准号: 14656117
• 负责人: 長谷川 喜久
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14656117/
• 关键词: インヒビン; アクチビン; 肝細胞; K562; レセプター; 結合蛋白質; FSH; 卵胞; 下垂本; インヒビンレセプター; 卵巣; 下垂体

前年度までの研究では、インヒビンの最も代表的な標角器官である下垂体からのインヒビンレセプターの精製を試みたが、組織が極めて小さいために成功しなかった。そこで、アクチビンの標的細細胞のK562と肝臓細胞でのアクチビンの作用について、検討した。1.コラゲナーゼ灌流法により肝細胞を分散し、プレートへ分注した翌日に各ホルモンを添加して、さらに3日間培養した。各種アクチビンは単独添加では有意なIGF-1分泌抑制が認められなかったが、GH存在下では強力なIGF-1分泌抑制が認められた。2.XTT法を用い肝細胞に細胞増殖に対するアクチビンの作用を比較したところ、単独添加およびEGF存在下ではアクチビンAとABに強い抑制作用が認められた。しかしHGF存在下ではアクチビンBにも顕著な増殖抑制作用が認められた。以上から、生体内においても様々な因子の影響を受けることにより、アクチビンの各サブタイプのレセプターへの親和性の変化およびレセプターの発現量の変化または未知のレセプターの存在などによりアクチビンの作用が異なって発現すると考えられる。3.K562細胞は赤芽球系の腫瘍細胞である。アクチビンはこの細胞に作用して、細胞の分化を促進し、ヘモグロビン産生を誘導することが知られている。この現象をアクチビン・インヒビンアッセイ法に開発し、我々の精製した3種類のアクチビンを用いてヘモグロビン産生活性を確認した。さらに、インヒビンの単独、あるはアクチビンの併用添加により、K562細胞にインヒビンが作用することを明らかにした。この細胞を大量培養することにより、インヒビンレセプター単離とアクチビンとのクロストークを明らかにする展望が開けた。本研究助成金により、インヒビンとアクチビンが作用する培養細胞と機能を発見し、今後の研究の大きな発展のきっかけ得ることが出来た。

Before the annual ま で の research で は, イ ン ヒ ビ ン の も most representative な standard Angle organs で あ る pituitary か ら の イ ン ヒ ビ ン レ セ プ タ ー の refined を try み た が, organization が め て small さ い た め に successful し な か っ た. そ こ で, ア ク チ ビ ン の の mark fine cell K562 と routine liver cells で の ア ク チ ビ ン の role に つ い て, beg し 検 た. 1. コ ラ ゲ ナ ー ゼ perfusion method に よ り liver cells scattered を し, プ レ ー ト へ points note し た next に each ホ ル モ ン を add し て, さ ら に 3 day training し た. Various ア ク チ ビ ン は 単 alone add で は intentionally な IGF 1 secretion inhibition が recognize め ら れ な か っ た が, presence of GH で は powerful な IGF 1 secretion inhibition が recognize め ら れ た. 2. を XTT method with い liver cells に rights colonization に す seaborne る ア ク チ ビ ン の role を compare し た と こ ろ, 単 alone add お よ び EGF in the presence of で は ア ク チ ビ ン A と AB に strong い inhibition が recognize め ら れ た. In the presence of <s:1> な HGF, で ア ア チビ チビ チビ な Bに 顕 顕 な has a な inhibitory effect on proliferation が believes められた. Above か ら, born in vivo に お い て も others 々 な factor の を by け る こ と に よ り, ア ク チ ビ ン の each サ ブ タ イ プ の レ セ プ タ ー へ の affinity の variations change お よ び レ セ プ タ ー の 発 amount is の variations change ま た は unknown の レ セ プ タ ー の is な ど に よ り ア ク チ ビ ン の role が different な っ て 発 now す る と exam え ら れ る. 3.K562 cells である red bud stem abscess cells である. ア ク チ ビ ン は こ の cells に し て, cells の を promote し, ヘ モ グ ロ ビ ン produce を induced す る こ と が know ら れ て い る. こ の phenomenon を ア ク チ ビ ン · イ ン ヒ ビ ン ア ッ セ イ method に open 発 し, I 々 の refined し た 3 kinds の ア ク チ ビ ン を with い て ヘ モ グ ロ ビ ン producing active を confirm し た. さ ら に, イ ン ヒ ビ ン の 単 alone, あ る は ア ク チ ビ ン の and add に よ り, K562 cells に イ ン ヒ ビ ン が role す る こ と を Ming ら か に し た. を こ の cell mass culture す る こ と に よ り, イ ン ヒ ビ ン レ セ プ タ ー 単 from と ア ク チ ビ ン と の ク ロ ス ト ー ク を Ming ら か に す る outlook が open け た. This study help into gold に よ り, イ ン ヒ ビ ン と ア ク チ ビ ン が role す る culture cell と function を 発 see し, future study の の き な 発 exhibition の き っ か け must る こ と が た.

项目成果

Activin isoforms signal through type I receptor serine/threonine kinase ALK7

• DOI: 10.1016/j.mce.2004.03.009
• 发表时间: 2004-05-31
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY
• 影响因子: 4.1
• 作者: Tsuchida, K;Nakatani, M;Sugino, H
• 通讯作者: Sugino, H

Kaneko H, Noguchi J, Kikuchi K, Todoroki J, Hasegawa Y: "Alterations in peripheral concentrations of inhibin A in cattle studied using a time-resolved imuunofluorometric assay"Biology of Reproduction. 67. 38-45 (2002)

Kaneko H、Noguchi J、Kikuchi K、Todoroki J、Hasekawa Y：“使用时间分辨免疫荧光测定法研究牛体内抑制素 A 外周浓度的变化”生殖生物学。

Changes in plasma ghrelin and growth hormone concentrations in mature Holstein cows and three-month-old calves.

成熟荷斯坦奶牛和三个月大的小牛血浆生长素释放肽和生长激素浓度的变化。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Anim Sci 82
• 作者: H.Miura;et al.
• 通讯作者: et al.

Kaneko H, Noguchi J, Kikuchi K, Todoroki J, Hasegawa Y: "Molecular weight forms of inhibin A and inhibin B in bovine testis change with age"Biology of Reproduction. (in press). (2003)

Kaneko H、Noguchi J、Kikuchi K、Todoroki J、Hasekawa Y：“牛睾丸中抑制素 A 和抑制素 B 的分子量形式随年龄变化”《生殖生物学》。

Hashimoto O, Tsuchida K, Ushiro Y, Hosoi Y, Hosho N, Sugino H, Hasegawa Y: "cDNA cloning and expression of human activin βE subunit"Molecular Cellular Endocrinology. 194. 117-122 (2002)

Hashimoto O、Tsuchida K、Ushiro Y、Hosoi Y、Hosho N、Sugino H、Hasekawa Y：“人激活素 βE 亚基的 cDNA 克隆和表达”分子细胞内分泌学 194. 117-122 (2002)。