インヒビンレセプターの同定とシグナル伝達に関する研究

抑制素受体的鉴定及信号转导研究

基本信息

批准号：
14656117
负责人：
長谷川喜久
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度までの研究では、インヒビンの最も代表的な標角器官である下垂体からのインヒビンレセプターの精製を試みたが、組織が極めて小さいために成功しなかった。そこで、アクチビンの標的細細胞のK562と肝臓細胞でのアクチビンの作用について、検討した。1.コラゲナーゼ灌流法により肝細胞を分散し、プレートへ分注した翌日に各ホルモンを添加して、さらに3日間培養した。各種アクチビンは単独添加では有意なIGF-1分泌抑制が認められなかったが、GH存在下では強力なIGF-1分泌抑制が認められた。2.XTT法を用い肝細胞に細胞増殖に対するアクチビンの作用を比較したところ、単独添加およびEGF存在下ではアクチビンAとABに強い抑制作用が認められた。しかしHGF存在下ではアクチビンBにも顕著な増殖抑制作用が認められた。以上から、生体内においても様々な因子の影響を受けることにより、アクチビンの各サブタイプのレセプターへの親和性の変化およびレセプターの発現量の変化または未知のレセプターの存在などによりアクチビンの作用が異なって発現すると考えられる。3.K562細胞は赤芽球系の腫瘍細胞である。アクチビンはこの細胞に作用して、細胞の分化を促進し、ヘモグロビン産生を誘導することが知られている。この現象をアクチビン・インヒビンアッセイ法に開発し、我々の精製した3種類のアクチビンを用いてヘモグロビン産生活性を確認した。さらに、インヒビンの単独、あるはアクチビンの併用添加により、K562細胞にインヒビンが作用することを明らかにした。この細胞を大量培養することにより、インヒビンレセプター単離とアクチビンとのクロストークを明らかにする展望が開けた。本研究助成金により、インヒビンとアクチビンが作用する培養細胞と機能を発見し、今後の研究の大きな発展のきっかけ得ることが出来た。

往年的研究试图从垂体（抑制素的最具代表性的靶向器官）中纯化抑制素受体，但由于组织极小而没有成功。因此，我们研究了激活素在肝细胞中激活素和激活素的靶细胞K562中的作用。 1。肝细胞通过胶原酶灌注法分散，并在分配到板上的第二天添加激素，再培养3天。尽管单独添加激活素时未观察到IGF-1分泌的显着抑制作用，但在GH存在下，观察到IGF-1分泌的强抑制。 2。使用XTT方法比较激活素对肝细胞中细胞增殖的作用时，在存在EGF的情况下，观察到激活素A和AB的强抑制作用。然而，在HGF存在下，激活素B也表现出显着的抑制作用。从上述过程中，人们认为，由于体内各种因素的影响，由于激活素亚型的受体的亲和力变化，受体表达水平的变化或未知受体的存在，激活素的作用被差异表达。 3.K562细胞是红细胞系统的肿瘤细胞。众所周知，激活素可作用于该细胞，促进细胞分化并诱导血红蛋白产生。这种现象被发展为抑制激活素的测定法，并使用纯化的三种类型的激活素证实产生血红蛋白的能力。此外，据揭示了抑制素通过单独添加抑制素或与激活素结合来作用于K562细胞。大量这些细胞为非温素受体分离和激活素之间的串扰打开了前景。这项研究赠款揭示了抑制素和激活素作用的培养细胞和功能，并能够为未来研究的巨大发展提供催化剂。