外来遺伝子を導入したヤブカ原虫を用いたデング熱媒介蚊の新しい防除戦略

利用引入外源基因的伊蚊原生动物控制登革热病媒蚊的新策略

• 批准号: 14657065
• 负责人: 小林 睦生
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657065/
• 关键词: デング熱媒介蚊; ヤブカ寄生原虫; 外来遺伝子導入; 防除; ネッタイシマカ; ヒトスジシマカ; Ascogregarina spp.; 交尾行動; Ascogregarina; オーシスト; スポロゾイト

デング熱媒介蚊の新しい防除法の確立のために、ネッタイシマカおよびヒトスジシマカに寄生する原虫であるAscogregaria spp.の生物学的観察および解析を行い、外来遺伝子導入に必要な関連分子の解析を行った。また、外来遺伝子の候補分子の検索として、ヤブカ類の交尾行動の観察を行った。ヤブカ寄生原虫に関しては、宿主特異性が高く、大量に感染させることによって感染ステージであるオーシストを多数回収可能で、低温や乾燥に強く、長期保存も可能である。これら原虫のrDNAのSSU領域をPCR法で増幅し、塩基配列を解析し、両種の配列の違いを明らかにした。また、遺伝子導入のために強力なプロモーター検索のために、HSP70遺伝子の解析を行い、部分配列を得ることができた。これらの解析から、Ascogregarinaは人体寄生の原虫類(Toxoplasma等)が属するアピコンプレクス門に位置付けられることが明らかとなった。寄生原虫への外来遺伝子の導入に関しては、生理機能や行動を攪乱する物質で、低分子であることが望まれる。今回、ヤブカの交尾行動に関して基礎的な観察を行った。交尾が1回のみで、その後雌は雄に対して交尾拒否を示す種類が知られている。ヒトスジシマカの羽化成虫を用い、経時的に交尾の有無および回数をビデオ録画で記録した。その結果、羽化後1-2日の若い成虫では交尾率が低く、4日以上経過した成虫で頻繁に交尾が行われる事、雌は明らかに複数回交尾をすることが明らかとなった。2回目以降の交尾で実際精子が雌の受精嚢に移行しているかは不明である。ネッタイシマカでも同様の実験を行い、交尾行動を詳細に観察して、交尾拒否行動が見られるか明らかにしたい。なお、導入する外来遣伝子の候補分子をより広範に検索することが重要と考えられた。

デ ン グ hot mosquito の new し の い control method to establish の た め に, ネ ッ タ イ シ マ カ お よ び ヒ ト ス ジ シ マ カ に parasitic す る parasite で あ る Ascogregaria SPP. の biology 観 examine お よ び parsing line を い, exotic but 伝 import に necessary な masato even molecular の を line っ た. ま た, exotic but 伝 の alternate molecular の 検 cable と し て, ヤ ブ カ class の mating action の 観 examine を line っ た. ヤ ブ カ parasitic protozoa に masato し て は, high host specificity が く, a large number of に infection さ せ る こ と に よ っ て infection ス テ ー ジ で あ る オ ー シ ス ト を most 収 may で back strong, low temperature dry や に く, long-term preservation も may で あ る. こ れ ら parasite の rDNA の SSU で を PCR method raised し picture, salt base with column を parsing し, struck の match column の violations い を Ming ら か に し た. ま た, but 伝 import の た め に powerful な プ ロ モ ー タ ー 検 cable の た め に, traces of HSP70 伝 の analytic を い, department distribution sequence を must る こ と が で き た. こ れ ら の parsing か ら, Ascogregarina は human parasitic の parasite class (Toxoplasma, etc) が す る ア ピ コ ン プ レ ク ス door に position pay け ら れ る こ と が Ming ら か と な っ た. Traces of parasitic protozoa へ の foreign 伝 son の import に masato し て は, physiology や action を disrupt す で る material, low molecular で あ る こ と が hope ま れ る. This time, the ヤブカ ヤブカ handover operation に is related to the て basis of the な観 inspection を operation った. Mating が 1 back の み で, そ の after female は male に し seaborne て mating refusal を す species in が know ら れ て い る. Youdaoplaceholder0, カ, カ. The emerging adult を was recorded by で, with the に mating of に over time and the presence or presence of および rounds, をビデ, and で. The た was recorded. そ の results, 1 to 2 days after eclosion の if い adult で は が low く mating rate, minimum 4 経 し た adult で frequent に mating が line わ れ る thing, female は Ming ら か に plural back to mating を す る こ と が Ming ら か と な っ た. Since the second round, <s:1> mating で interspermic sperm が female <s:1> fertilized follicle に transmigration <s:1> て る る unknown である. ネ ッ タ イ シ マ カ で も with others の be 験 を い, mating action を detailed に 観 examine し て, mating refusal action が see ら れ る か ら Ming か に し た い. な お, import す る foreign son sent 伝 の alternate molecular を よ り hiroo van に 検 cable す る こ と が important と exam え ら れ た.

项目成果

小林 睦生: "昆虫学大辞典(分担)"朝倉書店. 1200(920-933) (2003)

小林睦夫：《昆虫学词典（共享）》朝仓书店1200（920-933）（2003）。

Nihei, N., Yoshida, M., Kobayashi, M., Kanata, H., Shimamura R., Agui, N.: "Geographic information systems (GIS) analysis of the distribution of the redback spider Latrodectus hasseltii (Aranear:Theridiidae) in Osaka, Japan"Medical Entomology and Zoology.

Nihei, N.、Yoshida, M.、Kobayashi, M.、Kanata, H.、Shimamura R.、Agui, N.：“红背蜘蛛 Latrodectus hassseltii（Aranear：Theridiidae）分布的地理信息系统 (GIS) 分析

Sasaki T., Kobayashi M., Agui N.: "Detection of Bartonella quintana from body lice Pediculus humanus (Anoplura : Pediculidae) infesting homeless people in Tokyo by molecular technique"Journal of Medical Entomology. 39(3). 427-429 (2002)

Sasaki T.、Kobayashi M.、Agui N.：“通过分子技术从东京无家可归者感染的人体虱子虱子（Anoplura：虱子科）中检测到巴尔通体”医学昆虫学杂志。

小林睦生, 二瓶直子, 栗原 毅: "我が国のデング熱媒介蚊であるヒトスジシマカの分布域拡大について"病原微生物検出情報. 25(2). 10-11 (2004)

Mutsuo Kobayashi、Naoko Nihei、Tsuyoshi Kurihara：“扩大日本传播登革热的蚊子白纹伊蚊的分布范围”25(2) (2004)。

Kobayashi M., NiheiN., Kurihara T.: "Analysis of northern distribution of aedes albopictus (Diptera : Culicidae) in Japan by geographical information system"Journal of Medical Entomology. 39(1). 4-11 (2002)

Kobayashi M.，NiheiN.，Kurihara T.：“通过地理信息系统分析日本白纹伊蚊（双翅目：蚊科）的北部分布”医学昆虫学杂志。