胎盤絨毛細胞へのアニオントランスポーター遺伝子導入による胎児治療の試み

尝试通过将阴离子转运蛋白基因引入胎盘滋养层细胞来治疗胎儿

• 批准号: 14657258
• 负责人: 岡村 州博
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657258/
• 关键词: 有機アニオントランスポーター; OATP-E; 胎盤; 甲状腺ホルモン

ヒトの各末梢臓器での甲状腺ホルモン輸送に関係することが知られている有機アニオントランスポーターOATP-Eのヒト胎盤における発現の有無ならびに局在の同定、妊娠経過に伴う発現量の変化を検討するため、東北大学倫理委員会の承認ならびに産婦の同意のもとで本研究を行った。抗体作成:合成OATP-Eポリペプチド注射後のウサギ血清から抗OATP-Eポリクローナル抗体を精製し研究に供した。Western blot法:正期産帝王切開分娩直後の胎盤から超遠心分離した膜たんぱく、ならびに陽性対照としてヒト脳膜たんぱくを用い、抗OATP-E抗体を用いたWestern blot法により解析を行った。その結果、分子量約64kDaに特異的バンドの発現を確認した。免疫組織化学:正期産帝王切開分娩直後の胎盤から凍結切片標本を作成し、抗OATP-E抗体を用いた免疫染色、ならびに局在の同定としてHE染色を行った。その結果、合胞体栄養膜細胞(Syncytiotrophoblast)の表層(絨毛間腔側)細胞膜にのみ発現を認め、合胞体栄養膜細胞の基底層(間質側)細胞膜、細胞質、ならびにその他の絨毛構成細胞には発現を認めなかった。RT-PCR法:妊娠初期(first trimester)ならびに妊娠後期(third trimester)に娩出された胎盤からRNAを抽出し、RT-PCR法により妊娠経過に伴うOATP-E発現量の変化を解析した。その結果、概して妊娠初期での胎盤内OATP-E発現量は妊娠後期の発現量より多い(約3倍)傾向にあった。以上の結果により、OATP-Eが胎盤内における甲状腺ホルモン輸送に関与すること、また妊娠経過に伴い経母体的に取り込まれる甲状腺ホルモン量を調節していることが示唆された。

ヒ ト の each peripheral viscera で の thyroid ホ ル モ ン conveying に masato is す る こ と が know ら れ て い る organic ア ニ オ ン ト ラ ン ス ポ ー タ ー OATP - E の ヒ ト placenta に お け る 発 の now whether な ら び に bureau in の associated with fixed, pregnancy 経 に う 発 amount is の variations change を beg す 検 る た め, northeast university ethics committee の admitted な ら び に maternal の agreed の Youdaoplaceholder0 とで this study を lines った. Antibodies to finish: synthetic OATP - E ポ リ ペ プ チ ド injection after の ウ サ ギ serum か ら OATP resistance - E ポ リ ク ロ ー ナ ル antibody を refined に し research for し た. Western blot method: phase is to produce emperor cut straight after childbirth の placenta か ら buzzer-beaters heart separation し た membrane た ん ぱ く, な ら び に positive polices according to と し て ヒ ト 脳 membrane た ん ぱ く を with い, anti を OATP - E antibody with い た Western blot method に よ り parsing line を っ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> results, a molecular weight of approximately 64kDaに specific バ <e:1> ド ド を confirmed を た た. Immunohistochemical: phase is to produce emperors cut straight after childbirth の placenta か ら frozen biopsy specimens を made し, resisting OATP を - E antibody with い た immune dyeing, な ら び に bureau with fixed in の と し dyeing line を っ て HE た. そ の results, syncytial tech students.their ownship membrane cells (Syncytiotrophoblast) の surface (nap between cavity side) membranes に の み 発 を now recognize め の base layer, syncytial tech students.their ownship membrane cells (interstitial side) the cell membrane, cytoplasm, な ら び に そ の he の villi component cells に は 発 を now recognize め な か っ た. Rt-pcr method: early pregnancy (first trimester) な ら び に late pregnancy (third trimester) に childbirth さ れ た placenta か ら RNA を spare し, rt-pcr method に よ り 経 before pregnancy に with う OATP - E 発 amount is の variations change を parsing し た. そ の results, almost し て early pregnancy で の placenta in OATP - E 発 now quantity は gestation の 発 now quantity よ り い more (about 3 times) tendency に あ っ た. の above results に よ り, OATP - E が placenta に お け る thyroid ホ ル モ ン conveying に masato and す る こ と, ま た 経 before pregnancy に with い 経 maternal に take り 込 ま れ る thyroid ホ ル モ を ン quantity adjustment し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Sato K, Sugawara J, Okamura K, et al.: "Expression og Oganic Anion Transporting Polypeptide E(OATP-E) in Human Placenta"placenta. 24. 144-148 (2003)

Sato K、Sukawara J、Okamura K 等人：“人胎盘中有机阴离子转运多肽 E (OATP-E) 的表达”胎盘。

K.Sato, J.Sugawara, K.Okamura: "Expression of Organic Anion Transporting Polupetide E (OATRE) in human placenta"Placenta. 24. 144-148 (2003)

K.Sato、J.Sukawara、K.Okamura：“有机阴离子转运多肽 E (OATRE) 在人胎盘中的表达”胎盘。