細胞内遊離糖鎖を利用した移植臓器凍結蘇生法の開発

利用细胞内游离糖链进行移植器官冷冻复苏方法的开发

• 批准号: 14657292
• 负责人: 辻本 三郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657292/
• 关键词: 遊離糖鎖; 哺乳類細胞; 凍結; 蘇生; 臓器; 保存; 移植

細胞内遊離糖鎖を利用したホ乳類細胞・臓器の冷凍保存法について検討し、次の結果を得た。1、神経系細胞株PC-12細胞に対して細胞凍結(-20。C)・融解後の細胞生存率を遊離糖鎖代謝阻害剤である1ムデオキシマンノジリマイシン処理群と非処理群との間で比較検討した。その結果、1ムデオキシマンノジリマイシン処理群は細胞凍結・融解後の細胞生存率を有意に上げていた。2、精製遊離糖鎖をPC-12細胞にトランスフェクションした群と非処理群の間で細胞凍結(-20。C)・融解後の細胞生存率を比較検討した。その結果、遊離糖鎖細胞内トランスフェクション群は細胞凍結・融解後の細胞生存率を有意に上げていた。3、高マンノースオリゴサッカライドはPKC-eの凍結(-20。C)・融解後の酵素活性を有意に回復させていた。4、PC-12細胞を1ムデオキシマンノジリマイシン+DMSO群とDMSO単独群に分けて長期凍結保存(-80。C)し、融解後の細胞生存率を比較検討した。その結果、2ヶ月以上の長期凍結保存に対して1ムデオキシマンノジリマイシン+DMSO群では細胞生存率を有意に上げていた。5、1ムデオキシマンノジリマイシンを処理したラット心臓・肝臓・腎臓の各臓器において、24時間凍結保存(-20。C)後の細胞形態は非処理群と比較してより正常に近かった(細胞障害が少なかった)。以上の結果は、遊離糖鎖が細胞・臓器の冷凍保存に有効であることを示唆している。現在、1ムデオキシマンノジリマイシンを処理したラット心臓・肝臓・腎臓を24時間凍結保存後に移植し、それらの臓器が正常に機能するかどうかを検討中である。

The results were obtained by using intracellular sugar lock to detect the presence of glucose in the cryopreservation of milk cells. 1. PC-12 cell line was frozen at-20 ℃. C) Cell survival rate after thawing was compared between the treatment group and the untreated group by adding a glycolate metabolic inhibitor. The results showed that the cell survival rate after freezing and thawing was significantly higher than that after thawing. 2. PC-12 cells were frozen (-20) between the two groups. C) Comparison of cell survival rate after thawing. As a result, the addition of sugar lock to the intracellular growth rate of the cell population and the survival rate of the cell after freezing and thawing were intentionally improved. 3, high temperature temperature, high temperature. C) Enzymatic activity after melting is intentionally restored. 4. PC-12 cells were frozen for a long time (-80 ℃). C) Comparison of cell survival rates after thawing. The results showed that long-term frozen preservation for more than 2 months was beneficial to the survival rate of cells in the DMSO group. 5. 1. Freezing storage of all organs of the heart, liver and kidney for 24 hours (-20) C) Cell morphology after treatment was compared with normal group (cell damage was less). The above results show that the addition of sugar lock to the cryopreservation of cells and organs is effective. Now, after 24 hours of frozen preservation, the organ will be transplanted and its normal function will be examined.