血管誘導因子を用いた骨再生技術の開発

利用血管生成因子开发骨再生技术

基本信息

项目摘要

骨の再生を誘導するには骨芽細胞による造骨作用が最も重要であるが、それら細胞に栄養分や酸素を供給する血管新生が十分に伴うことが重要である。現在までの組織工学、特に多孔性セラミックス材料を用いた骨における組織工学において、骨芽細胞による造骨作用を高めるための多くの努力がなされているものの、血管誘導を伴わせた骨再生の試みは極めて少ない。本提案では、骨における組織工学モデル(ラットおよびヒト骨髄細胞を用いた)において血管誘導を遺伝子工学的に行い、骨再生効率が亢進することを示すことにより血管誘導因子の導入の重要性を明らかにし、今後の組織工学技術に貢献する。本年度は血管誘導因子VEGFのcDNAを導入したアデノウイルスを、ラット骨髄由来骨芽細胞(Maniatopoulosの方法による)に感染(条件は初年度に決定したもの)させ、多孔性セラミックス材料に播種した後、ラットの皮下、および骨欠損モデルに移植し、その後の経過を詳細に検討した。生化学的評価として、アルカリフォスファターゼ活性、オステオカルシン発現量により評価した結果、これらの因子がウイルス感染により亢進することが分かった。更に、組織化学的には、HE染色による新生骨の増加だけでなく、TRAP染色により破骨細胞を誘導していることも明らかになった。以上の結果から、VEGF遺伝子導入により、骨形成の亢進、骨リモデリングの誘導がおこることが明らかになり、VEGF遺伝子の導入が、骨における組織工学技術に有効に働くことが確認できた。
The induction of bone regeneration is the most important factor for osteogenesis in bone bud cells. Now, there are many efforts in tissue engineering, especially in porous materials, bone regeneration and vascular induction. This proposal aims to clarify the importance of introducing angiogenic factors into bone tissue engineering and to contribute to future tissue engineering techniques. This year, the introduction of VEGF cDNA into the body, the infection of bone bud cells (Maniatopoulos method), porous VEGF material after seeding, subcutaneous, and bone defect transplantation, and the process after transplantation were discussed in detail. Biochemistry evaluation, classification, activity, detection, evaluation, results, factors, and infection. In addition, histochemical staining, HE staining, osteoclast induction, TRAP staining, osteoclast induction, osteoclast induction, osteoclast, osteoclast induction, osteoclast induction, osteoc These results include VEGF gene introduction, bone formation hyperstimulation, bone regeneration induction, VEGF gene introduction, bone tissue engineering techniques.

项目成果

期刊论文数量(24)
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植村寿公: "骨髄細胞を用いた骨の組織工学と新規スキャホールドの開発"BIOベンチャー. Vol.3 No.4(発行予定). (2003)
Hisashi Uemura:“骨组织工程和使用骨髓细胞的新型支架的开发”BIO Venture Vol.3 No.4(待出版)。
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Toshimasa Uemura: "Overexpression of VEGF induces bone formation in the cultured bone transplantation model"Journal of Bone and Mineral Research. Vol.17 Suppl.1. S400 (2002)
Toshimasa Uemura:“VEGF 的过度表达在培养骨移植模型中诱导骨形成”《骨与矿物质研究杂志》。
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植村寿公, 小島弘子: "骨髄細胞を用いた骨の組織工学と新規スキャホールドの開発"バイオベンチャー(羊土社). 3, 4. 95-98 (2003)
Hisashi Uemura、Hiroko Kojima:“骨组织工程和使用骨髓细胞开发新支架”Bioventure (Yodosha) 3, 4. 95-98 (2003)。
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Y.C.Wang, T.Uemura, J.Dong, H.Kojima, J.Tanaka, T.Tateishi: "Application of Perfusion Culture System Improves In vitro and In vivo Osteogenesis of Rat Bone Marrow-Derived Osteoblastic Cells In Porous Ceramic Materials"Tissue Engineering. 9,6. 1205-1214 (2
Y.C.Wang、T.Uemura、J.Dong、H.Kojima、J.Tanaka、T.Tateishi:“灌注培养系统的应用改善了多孔陶瓷材料中大鼠骨髓来源的成骨细胞的体外和体内成骨作用”组织
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Toshimasa Uemura: "Cultured bone transplantation combined with gene transfer techniques And biodegradable scaffolds"Tissue Engineering. Vol.8 No.6. 1129 (2002)
Toshimasa Uemura:“结合基因转移技术的培养骨移植和可生物降解支架”组织工程。
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植村 寿公其他文献

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