横断性脊髄損傷の治療実験:硬膜切開による脊髄減圧と神経栄養因子遺伝子治療の試み

横贯性脊髓损伤治疗实验：硬脑膜切开脊髓减压及神经营养因子基因治疗试验

• 批准号: 14657376
• 负责人: 河上 江美子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657376/
• 关键词: 横断性脊髄損傷; ラット; 脊髄減圧; 修復; 遺伝子治療; 神経栄養因子; ラットシュワン細胞株; 定量的病変評価

横断性脊髄損傷の修復を目指して、その基盤となる研究を行って下記の結果を得た。1.ラットにおける安定した横断性脊髄損傷の作成法の開発「ナリシゲ」脊髄固定装置により脊椎を固定し中部胸椎を椎弓切除する。定位脳注入端子の先端に厚さ0.7mm、幅2mmの金属片を固定し、脊髄硬膜の背側表面から腹側に4mm進入させ60分間圧迫することにより、安定した横断性脊髄損傷を作成し得た。この後ラットは完全下肢麻痺となった。2.ラットの種差による予後の検討ウィスターおよびフィッシャーラットのオスを用いて検討し、ウィスターが脊損後、明らかに死亡頻度が少なく、長期の観察に耐えることを確認した。3.脊損病変の定量的評価2.5%グルタールアルデヒド還流固定-エポン包埋-横断面のトルイジンブルー染色して有髄線維を定量的に計測する事により、病変の程度を的に評価し得た。4.ラットの年齢による病巣範囲の差ウィスターラットの生後4カ月、1年、2年を比較し、加齢が進むほど症状の快復が不良で、病変の程度も強いことを見いだした。5.脊髄減圧の有無による損傷範囲の検討脊損作成直後の椎弓切除1.5mmの群と10mmの群を比較し、10mm椎弓切除群で病変が軽度であることを確認した。しかし硬膜切開例では死亡例が多く、病変の定量解析が出来なかった。6.神経栄養因子遺伝子組み換えウィルスの開発トランスフォーミング増殖因子(TGF)β2および神経成長抑制因子(GIF, MT-III)の組み換えウィルスを開発し、われわれが過去に開発したグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)、脳由来神経栄養因子(BDNF)と併せ、脊髄損傷に対する治療効果を検討した。7.病巣部への移植を目的としたウィスターラットシュワン細胞株を樹立した8.ヒト前立腺ガンの脊椎硬膜外静脈叢への腫瘍細胞塞栓による横断性脊損例の解析前立腺ガンとしては世界第一例を解析しその病的メカニズムを報告した。9.ヒト脊髄白質の上下行路の起始に関する解析ヒト剖検例の脊髄索変性を解析することによりその起始細胞に関して報告した。

The repair of transverse spinal cord injury を aimed at て and そ the となる base plate となる study を and って recorded the results を obtained た. 1. ラ ッ ト に お け る settle し た cross-sectional の spinal marrow damage done method の open 発 "ナ リ シ ゲ" spinal marrow fixtures に よ り を fixed し middle thoracic spine を vertebral arch removal す る. Orientation 脳 injection port の apex に of さ 0.7 mm, 2 mm thick の metal を fixed し, spinal marrow epidural の dorsal surface か ら ventral に 4 mm into さ せ 60 points between 圧 forced す る こ と に よ り, stable し た cross-sectional を spinal marrow damage done し た. Youdaoplaceholder0 ラット complete paralysis of the lower extremities となった. 2. ラ ッ ト の differentiae に よ の after る to beg ウ 検 ィ ス タ ー お よ び フ ィ ッ シ ャ ー ラ ッ ト の オ ス を with い て beg し 検, ウ ィ ス タ ー が ridge after damage, Ming ら か に death less frequency が な く, long-term の 観 examine に え resistant る こ と を confirm し た. 3. Spinal damage of disease - 2.5% の quantitative evaluation 価 グ ル タ ー ル ア ル デ ヒ ド also flow fixed - エ ポ ン embedding - cross-sectional の ト ル イ ジ ン ブ ル ー dyeing し て have marrow line d を quantitative に measuring す る matter に よ り, illness - の degree を に review 価 し た. 4. ラ ッ ト の years 齢 に よ る disease 巣 van 囲 の poor ウ ィ ス タ ー ラ ッ ト の raw カ four months, 1 year, 2 years after を し, plus 齢 が into む ほ ど symptoms の fast after bad が で, disease - strong degree of の も い こ と を see い だ し た. 5. Spinal marrow minus 圧 の presence of に よ る damage van 囲 の 検 for spinal damage done straight after の vertebral arch resection group 1.5 mm の と 10 mm の を compare し resection group, 10 mm vertebral arch で disease - が 軽 degrees で あ る こ と を confirm し た. The majority of the cases of dural incision are く, the death cases are が, and the disease changes are <s:1> quantitatively analyzed が out な った った った. 6. God 経 tech students.their ownship raise factor heritage 伝 subgroups み in え ウ ィ ル ス の open 発 ト ラ ン ス フ ォ ー ミ ン グ raised colonization factor (TGF) beta 2 お よ び god 経 growth inhibitory factor (GIF, MT - III) み の group in え ウ ィ ル ス を open 発 し, わ れ わ れ が past に open 発 し た グ リ ア cell lines by return 経 tech students.their ownship raise factor (GDNF), 脳 by return 経 tech students.their ownship raise factor (BDNF) と and せ, spinal marrow damage に す seaborne る treatment services fruit を beg し 検 た. 7. Disease 巣 department へ の transplantation を purpose と し た ウ ィ ス タ ー ラ ッ ト シ ュ ワ ン cell lines を set し た 8. ヒ ト front gland ガ ン の spinal epidural venous plexus へ の swollen sores cells plug bolt に よ る cross-sectional ridge analytical front gland damage cases の ガ ン と し て は world first を parsing し そ の disease メ カ ニ ズ ム を report し た. 9. ヒ ト spinal marrow white matter の の starting on the up and down に masato す る parsing ヒ ト cutting 検 cases の ridge marrow rope - を parsing す る こ と に よ り そ の cancer-initiating cell に masato し て report し た.

项目成果

Kikuchi-Horie K, Kawakami E, et al.: "Distinctive expression of midkine in the repair period of rat brain during neurogenesis : immunohistochemical and immunoelectron microscopic observations"J Neurosci Res. 75. 678-687 (2003)

Kikuchi-Horie K、Kawakami E 等人：“神经发生过程中大鼠脑修复期中期因子的独特表达：免疫组织化学和免疫电子显微镜观察”J Neurosci Res。

Oyanagi K, Kawakami E, et al.: "Widespread vertebral and epidural venous pelxus metastasis of prostatic carcinoma presenting wedge-shaped radial lesions in the spinal cord"Neuropathology. 23. 296-300 (2003)

Oyanagi K、Kawakami E 等人：“前列腺癌的广泛椎体和硬膜外静脉丛转移，在脊髓中呈现楔形放射状病变”神经病理学。

Ito U, Kawakami E, et al.: "Maturation phenomenon in cerebral ischemia V"Springer-Verlag. 189-196 (2004)

Ito U、Kawakami E 等人：“脑缺血 V 中的成熟现象”Springer-Verlag。

Ito U, Kawakami E, et al.: "Temporal profile of experimental ischemic edema after threshold amount of insult to induce infarction-ultrastructure, gravimetry and Evans' blue extravasation"Acta Neurochir. 86. 131-135 (2003)

Ito U、Kawakami E 等人：“诱导梗塞阈值损伤后实验性缺血性水肿的时间特征 - 超微结构、重量测定和埃文斯蓝色外渗”Acta Neurochir。

Oyanagi K, Kawakami E, et al.: "Amyotrophic lateral sclerosis : on the origin of the degenerated fibers in the white matter of the spinal cord"Progress of amyotrophic lateral sclerosis research. (印刷中).

Oyanagi K、Kawakami E 等人：“肌萎缩侧索硬化症：脊髓白质中退化纤维的起源”肌萎缩侧索硬化症研究进展（正在出版）。