浮遊増殖性ヒト卵巣癌細胞株における足場非依存性増殖能の獲得メカニズム

漂浮人卵巢癌细胞系获得贴壁不依赖性生长能力的机制

• 批准号: 14657417
• 负责人: 河原 和美
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657417/
• 关键词: 足場非依存性増殖能; 卵巣癌; 細胞株; Bc1-2; MAPK cascade; ERK; Ras; 癌転移; anoikis; Bcl-2

卵巣癌における、"足場非依存性増殖能"の獲得機序を自然発生した癌細胞で検討するため高度足場非依存性増殖能を有すヒト卵巣癌細胞株を培養樹立し、シグナル伝達における特徴を分子生物学的に検討した。同意の得られた卵巣癌患者腹水より培養を行った。初代培養にて培地中に浮遊してきた細胞のみをコラーゲンコートシャーレ上で再培養することにより細胞株TAC3を樹立した。TAC3はコラーゲン上では接着性に増殖するのに対し、通常のシャーレ上では浮遊性に増殖した。倍加時間は接着時、浮遊時共に約27時間であった。核型は47XXで1,16番染色体に異常を認めた。ヌードマウス皮下移植では全ての接種マウスにオリジナルの卵巣癌と類似した腫瘍の形成を認めた。シグナル伝達における特性としてアポトーシス関連蛋白の解析とFAKおよびMAP kinase cascadeの解析の解析を行った。TAC3ではBc1-2の強発現とMEK、ERKの浮遊による活性亢進、およびRasの恒常的活性亢進を認めた。またシグナル伝達阻害剤による増殖阻害効果の検討では、MEK inhibitor U0126は接着細胞よりも浮遊細胞においてより顕著に細胞増殖を阻害した。浮遊によるERK活性亢進のメカニズムとしては、足場からの離脱によって活性化された何らかのシグナルがMEKのレベルでMAPK cascadeに流入することが明らかとなった。このシグナルの流入にはRasの活性亢進が関与している可能性が推察された。MEK Inhibitorが浮遊細胞の増殖をより顕著に抑制したという結果は、新たな抗転移シグナル療法の可能性を示唆するのと考えらる。TAC3は、卵巣癌の転移や腹膜播腫の克服を目指した新たな治療戦略の開発・研究において非常に有用な細胞株と考えられる。

The sequence of ovarian cancer cell culture and foot-site independent colonization has been obtained in the order of natural ovarian cancer cell line culture, foot-site independent colonization and high-level non-dependent colonization. It is agreed that the ascites of patients with egg cancer should be obtained. In the first generation of culture, the cell line TAC3 was isolated from the ground. On the TAC3, there is a close connection between the colonies and the colonies, usually the buoyant colonies. The total time of double time and floating time is about 27 hours. The karyotype "47XX" 1 and 16 chromosomes are often recognized. In the case of subcutaneous transplantation, the type of ovarian cancer seems to be recognized after subcutaneous transplantation. We need to know how to analyze the properties of FAK proteins, FAK proteins, proteins, TAC3 Bc1-2 strongly showed hyperactivity of MEK, ERK, and constant activity of Ras. This means that the fruit is affected, MEK inhibitor U0126, and then the cell population is affected by the cell population. The buoyant ERK activity is high, and the foot field is not active. What is the reason for the increase of MEK activity? the flow of MAPK cascade into the market. The possibility of the inflow of high activity into the Ras and the possibility of inflow is to detect the possibility. MEK Inhibitor buoyant cell colonization tests show that the results of inhibition and anti-migration tests indicate the possibility of anti-migration. TAC3, Ovarian Cancer transfer, Peritoneal Immunization, overcoming the Target Index, New Therapy, start of Research, Clinical study is very useful to test cell lines.

项目成果

Yukiko Nishikawa: "Establishment of a novel human ovarian cancer cell line with high anchorage-independent growth ability."International Journal of Oncology. 23. 1679-1686 (2003)

Yukiko Nishikawa：“建立具有高贴壁依赖性生长能力的新型人类卵巢癌细胞系。”国际肿瘤学杂志。