副交感ニューロンにおけるF1CRhR/環状AMP信号の映像化

副交感神经元中 F1CRhR/环 AMP 信号的可视化

• 批准号: 14657480
• 负责人: 鈴木 隆
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657480/
• 关键词: 顎下神経節; 血管作動性小腸ペプチド; 下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド; 細胞内環状AMP濃度; 細胞内Ca2+濃度; L型カルシウムチャネル; VPAC1受容体; PAC1受容体

ハムスター顎下神経節細胞に下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド(PACAP)または血管作動性小腸ペプチド(VIP)を作用すると緩徐な膜コンダクタンスの減少と増加を伴う脱分極を発現する。同時に、PACAP, VIPは後ニューロン細胞体の高閾値活性化L型Ca2+チャネルを濃度依存性、電位非依存性に抑制(Endoh and Suzuki準備中)する。これは、Gタンパクのαサブユニットの関与を示唆し、PKA-mediated phosphorylationの関与を示唆する。受容体には、VPAC1またはVPAC2,PAC1の関与が示唆されている(Hayashi et al.,2002)。セカンドメッセンジャーの経路はGsを介するcAMP-kinase, Gq/11を介するIP3-Ca2+-CaM kinase, DAG-kinase Cの経路がある。わたしは、PACAPとVIP作用中のPKAへの活性化状態の変化と[Ca2+]iの変化を捉える。1.ハムスター顎下神経節から単一細胞を酵素処理を行い単離した。2.単一ニューロンをカバーグラスに貼り付けた。3.蛍光反応エネルギー変換法に基づくFlCRhR(蛍光色素を結合したkinase A)を細胞に注入した。4.fura-2を細胞内に注入して細胞内Ca2+濃度を測定した。5.FlCRhRの注入手技が十分でなく、細胞内cAMP濃度変化の解析ができていない。

ハ ム ス タ ー jaw rather 経 ganglion cells に pituitary ア デ ニ ル acid シ ク ラ ー ゼ activeness ポ リ ペ プ チ ド (PACAP) ま た は blood vessel for small intestine ペ プ チ ド (VIP) を role す る と slow xu な membrane コ ン ダ ク タ ン ス の reduce と raised plus を with う points off very を 発 now す る. At the same time, に, PACAP, and VIP are followed by ニュ ロ ロ ロ in the <s:1> cell body with high-threshold activation of L-type Ca2+チャネ チャネ を を concentration-dependent and potential-independent に inhibition (Endoh and Suzuki in preparation)する. こ れ は, G タ ン パ ク の alpha サ ブ ユ ニ ッ ト の masato and を business し, PKA - mediated phosphorylation の masato and を in stopping す る. The acceptor に に, VPAC1また また VPAC2,PAC1 <s:1> is related to が and されて る る(Hayashi et al.,2002). セ カ ン ド メ ッ セ ン ジ ャ ー の 経 road は Gs を interface す る cAMP - kinase, Gq / 11 を interface す る IP3 - Ca2 + - CaM kinase, DAG - kinase C の 経 road が あ る. In the action of わた と and PACAPとVIP, the <s:1> PKAへ <s:1> active state <e:1> changes と[Ca2+]i <s:1> changes を capture える. 1. Youdaoplaceholder0 submandibular Shinto segment ら単 one cell を enzyme treatment を row 単 単 separate た た. 2. Youdaoplaceholder0 ニュ ロ ロ ロ をカバ グラスに グラスに グラスに post ニュ pay けた. 3. 蛍 light anti 応 エ ネ ル ギ ー variations in law に base づ く FlCRhR (蛍 photopigment を combining し た kinase A) に を cells injected し た. 4.fura-2を intracellular に injection of て intracellular Ca2+ concentration を determination of た た. 5.FlCRhR flow injection technique が ten points でなく, intracellular cAMP concentration change <e:1> analysis がで て て な な.

项目成果

Hayashi, Endoh, Shibukawa, Yamamoto, Suzuki: "VIP and PACAP inhibit L-, N-and P/Q-type Ca2+ channels of parasympathetic neurons in a voltage independent manner"Bull Tokyo Dental College. 43(1). 31-39 (2002)

Hayashi、Endoh、Shibukawa、Yamamoto、Suzuki：“VIP 和 PACAP 以电压独立的方式抑制副交感神经元的 L-、N-和 P/Q 型 Ca2 通道”Bull 东京牙科学院。