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ブリのリンパ球の分類に関する各種マーカーの研究

黄尾淋巴细胞多种分类标志物的研究

基本信息

批准号：
04660206
负责人：
楠田理一
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究ではブリのリンパ球亜群を分類するため、ブリの胸腺細胞の性状を調べたのち、胸腺細胞を免疫源としてTリンパ球を認識するモノクローナル抗体(mAb)の作製を試みた。ブリ胸腺細胞上の表面マーカーの存在性について調べ、その性状をほ乳類と比較すると、ヒツジ赤血球レセプター保有性が異なるほかは類似したことから、胸腺細胞をT細胞として用いれることが示唆された。そこで、ブリから採取した胸腺細胞でマウスを免疫し、ハイブリドーマを常法によって作製した。得られたハイブリドーマのうち、胸腺細胞には反応するが、赤血球にはしない抗体を産生するクローンをELISAで選択し、マウス腹腔内で培養してmAbを調製し、得られた抗体をYeT-2と名付けた。各種リンパ組リンパ球を分離し、それぞれの反応性をEPICS756でフローサイトメトリー解析したところ、YeT-2は未梢血の89.7%、脾臓の87.5%、頭腎の59.7%、および胸腺のリンパ球の69.8%と反応した。ウエスタンブロッティングの結果、Yet-2は約115kDaの白血球膜タンパク質と反応することがわかった。YeT-2を用いたパニング法で末梢血リンパ球をYeT-2抗原を保有する細胞と保有しない細胞に分離し、それぞれのリンパ球群のマイトジェンに対する反応性を調べたところ、YeT-2 抗原保有細胞はほ乳類のT細胞を刺激するConAと反応し、B細胞を刺激するLFSとは反応しなかったことからT細胞に、YeT-2抗原非保有細胞はLPSに反応し、ConAとは反応しなかったことからB細胞に同定できた。以上のように、本mAbを用いることによって、ブリのリンパ球のTおよびB細胞の亜群に分類できることが明かとなった。

In this study, the whole population was divided into four groups, the thymus cells, the immune source of the thymus cells and the antibody (mAb) were tested. On the cell surface of the thymus, the presence of phenotype, trait, and retention of red blood cells are similar to those of the thymocytes. the thymus cells show that they are instigated by the presence of the cells. The thymus cells were immunized and immunized, and the normal method was used to treat them. The results showed that the antigens of thymus, thymus, red blood cells, antibody, ELISA, abdominal cavity, mAb, and YeT-2 were detected. All kinds of drugs were separated from each other, and the results were analyzed in terms of EPICS756, YeT-2, spleen, spleen, thymus and thymus. The results showed that the results of Yet-2 were significantly different from those of 115kDa. The peripheral blood YeT-2 antigens were detected by the method of YeT-2 antigens, and the YeT-2 antigens were isolated from the peripheral blood cells, the cells were isolated from the cells, the cells were isolated, the cells were isolated, the cells were reacted, the YeT-2 antigens were preserved, the T cells were stimulated, and the ConA antibodies were detected. B cells were stimulated by LFS, anti-T cells, YeT-2 antigen non-retained cells, LPS cells, and ConA antigens. The above information and this mAb are used to determine whether or not the group is classified as a group of cells.