変形性関節症を導くタイプIIコラーゲン遺伝子変異の分子生物学的研究

导致骨关节炎的II型胶原蛋白基因突变的分子生物学研究

• 批准号: 04670896
• 负责人: 真角 昭吾
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-04670896/
• 关键词: 軟骨コラーゲン; 制限酵素.多型; サザン法; PCR法

【実験計画あらまし】変形性関節症を導く遺伝子を、軟骨(タイプII)コラーゲン遺伝子の制限酵素多型(RFLP)のうちHindIIIの近傍に求める。【実験ステップ】(1)既報告として、変形性関節症と軟骨(タイプII)コラーゲン遺伝子上HindIIIのRFLPが相関するというものが、二種ある。しかし、これはいずれもHindIIIのRFLPが、コーカシアンを標準としていた。(2)日本人におけるHindIIIのRFLPの頻度(標準)を求める必要がある。(3)132人分の白血球DNAを準備した。(4)当初これらをサザン法にて解析を開始した。しかし、データがふらつくため中止した。(5)実験開始時点での、唯一の塩基配列報告が、RFLPのためHにndIII座を含んでいなかった。よってHindIII座を含む遺伝子を新たにクローニングし直し、塩基配列を決定した。(6)この塩基配列をもとにPCRプライマーを3回にわたってデザインし、これでPCR‐RFLPが可能になった。(7)このPCR‐RFLPは容易で再現性も良好である。【実験結果】報告書作成時点で、約80例の解析が終了した。日本人におけるHindIIIのRFLPの頻度はコーカシアンのそれと明らかに違う!従って、日本人では変形性関節症を導く遺伝子をHindIII座の近傍には求められない、ということになる。これは既報告に対する重大な反論である。【これからの見通し】重大な反論であるため、PCR‐RFLPの解析を慎重に続行する。しかし、当初の目的であった変形性関節症を導く遺伝子をHindIIIの近傍に求める、というのは意味がない、ということを証明してしまうことになってしまった。

The gene, cartilage (II) and restriction enzyme polymorphism (RFLP) of the gene are closely related to the variant arthrosis. (1) Both reports, variant arthrosis and cartilage (II), HindIII and RFLP on the gene, are related. In the middle of the day, the standard of RFLP was set. (2)Japanese HindIII RFLP Frequency (Standard) (3)132 samples of leukocyte DNA were prepared. (4)At the beginning, the analysis of the law began.しかし、データがふらつくため中止した。(5)Start time, unique base alignment report, RFLP, ndIII, including The new structure of Hindi III contains the following elements: (6)The gene sequence of this gene can be detected by PCR. (7)PCR RFLP is easy to reproduce. [Results] About 80 cases of analysis were completed when the report was prepared. The frequency of HindIII RFLP in Japanese is different from that in Japanese.従って、日本人では変形性关节症を导く遗伝子をHindIII座の近傍には求められない、ということになる。This report is a major counter-argument. The analysis of PCR RFLP was carried out carefully. The purpose of the original joint disease is to prove that the joint disease is caused by the joint disease.