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バターミルクに含まれる新しい糖含有リン脂質の構造と生理活性

酪乳中新型含糖磷脂的结构和生理活性

基本信息

批准号：
04680063
负责人：
大橋昌子
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Ochanomizu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至 1993
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、当研究室で発見したバターミルク中の未知の糖含有リン脂質について、(1)その化学構造の解明、(2)このような糖含有リン脂質が一般の市販ミルク製品にどの程度存在するか免疫染色法での定量分析、また本物質の起源の追求、(3)培養細胞を用いて本リン脂質の生理活性の解明、以上の3点を目的とした。これまでの成果として、(1)バターミルクから分離したこの糖含有リン脂質は、主として赤外吸収、FAB-MSイオン解析、分子量、および酸加水分解による生成物のGC-MS分析の結果から、リン脂質の一種であるフォスファチジルエタノールアミン(PE)とラクトースが脱水縮合した形の化学構造を有することが判明し、一種のアミノカルボニル反応による生成物であると考えられた。(2)この物質が一般の市販乳製品にどの程度含まれるかを検討するため、予め本物質に対する抗体を作成し、これを用いて粉ミルク3種、練乳2種、牛乳6種、加工牛乳3種の脂質画分について、薄層クロマトグラフ-免疫染色法により分離定量を行った。その結果、粉末状のミルクや練乳では糖含有リン脂質が総リン脂質量の4〜6%と比較的高い値を占めたが、一般の牛乳では0.5%と低い含量であることが判った。また加工乳は約1〜3%含み、雪印アカデイ牛乳が飲用牛乳の中で最も高い値を示した。以上の様に粉ミルクや加工乳に多く存在する事実から、この糖含有リン脂質はミルクの加熱・濃縮処理で起こる生成物であると考えられた。本研究では実際に種々の濃度の牛乳を120℃で加熱することを試み、時間とともに本物質が生成増加すること、また同時にリン脂質組成が変わり特にPE量が低下することを明らかにした。(3)最後に、培養細胞を用いての生理活性の検討に当たり、本リン脂質が不足となり再調製する必要が生じた。今回は大量のスキムミルクからの分離精製を試み、現在、十分量の試料が準備できた段階である。今後これを培養細胞に種々の条件で投与し細胞増殖率・細胞変化を観察する予定である。

This study aims at: (1) elucidation of the chemical structure of the sugar and lipid in the sample;(2) quantitative analysis of the sugar and lipid in the sample by immunostaining;(3) elucidation of the physiological activity of the lipid in cultured cells. The results of GC-MS analysis of the products of acid hydrolysis and hydrolysis were as follows: (1) The sugar content of lipid, main component, red absorption, FAB-MS analysis, molecular weight, and GC-MS analysis of the products of acid hydrolysis were determined. The chemical structure of one kind of lipid was determined. A kind of anti-corruption product. (2)This substance is used for the preparation of antibodies against general market dairy products, for the separation and quantification of lipids from 3 kinds of Chinese powders, 2 kinds of refined milk, 6 kinds of milk and 3 kinds of processed milk by TLC immunostaining. As a result, powdered milk contains 4 ~ 6% of total lipid, while ordinary milk contains 0.5% of total lipid. Processed milk contains about 1 ~ 3% of milk, and snow marks are the highest in drinking milk. The above mentioned powder and processed milk contain many substances, such as sugar, lipid and heat. In this study, the concentration of seed in milk was increased by heating at 120℃, and the content of PE was decreased by heating at 120 ℃. (3)Finally, when the physiological activity of cultured cells is discussed, it is necessary to reformulate the lipid deficiency. A large number of samples were prepared for separation and purification. In the future, the conditions for cell culture, cell proliferation and cell transformation will be determined.