下垂体および脳神経ペプチド受容体の発現調節機序の解析

垂体及脑神经肽受体表达调控机制分析

• 批准号: 05680713
• 负责人: 木村 信子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05680713/
• 关键词: 神経ペプチド; 受容体; ソマトスタチン; 甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン; mRNA; 下垂体; 脳

脳に広範に存在する神経ペプチドである、ソマトスタチン(SS)や甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン(TRH)は、細胞膜7回膜貫通型受容体に働き下垂体腺分泌の調節や、多彩な中枢神経作用を示す。私達はこれまで、下垂体の受容体活性がホルモンによって調節されること、SS受容体のサブタイプの存在、脳の発育過程や神経細胞の分化との関連性を示唆する結果を示してきた。本研究はこれらの受容体の発現調節機序や機能を分子レベルで解析することを目的としている。本年度の研究から次に示す結果を得た。(1)SS受容体遺伝子は、この2年間に5種類のサブタイプcDNA(SSTR1-SSTR5)が単離されている。そこで、RT-PCR法による解析から下垂体GH_3細胞で発現しているサブタイプは4種類であることが分かった。SSTR2について、568bpのcDNA断片をクローニングしこれをプローブとしてmRNAレベルについて調べた。SS受容体活性に影響するホルモンは、mRNAレベルの変動をきたし、その発現を調節していることを明かにした。一方、マウス神経芽腫瘍株化NS20Y細胞の分化をDMSOで促した時のSS受容体活性の低下もmRNAレベルの変化と相関していることを明かにした。この系は、神経細胞の移動、増殖、分化におけるSS受容体発現の生理的意義を明かにするためにもよいモデルになり得る。(2)下垂体GH_3細胞のTRH受容体mRNAレベルがエストロゲンの作用によって増強されるメカニズムを明かにするため、TRH受容体cDNA(3687bp)を単離し、これを用いて細胞核run-onアッセイ系を確立し、エストロゲン作用を調べたところ、TRH受容体の転写率を高めることを明かにした。一方、脳のTRH受容体は、大脳、脳幹、脊髄において生後発育の初期から発現が認められたが、小脳では低い発現を示した。その生理的意義や末梢ホルモンによる制御機構の有無については現在検索中である。

There is a wide range of neurophysiological factors, such as thyroid hormone (SS), thyroid hormone (TRH), cell membrane 7-loop membrane penetrating receptor, hypophysis secretion regulation, and colorful central neurophysiological effects. The results show that the receptor activity of the pituitary gland is regulated, the existence of the receptor cell, the development process of the pituitary gland, and the relationship between the differentiation of the neuron. This study focuses on the regulation mechanism and function of receptor development. The results of this year's study are shown below. (1)SS In the past 2 years, 5 kinds of cDNA(SSTR1-SSTR5) have been isolated. The analysis of pituitary GH_3 cells by RT-PCR showed that there were 4 species of pituitary GH_3 cells. SSTR2 cDNA fragment, 568bp cDNA fragment SS is affected by the activity of the receptor, and mRNA expression is regulated. The expression of mRNA in SS receptor cells was significantly reduced when DMSO was used to promote the differentiation of NS20Y cells. The physiological significance of SS receptor development in the migration, proliferation and differentiation of neurocytes is clarified. (2)TRH receptor cDNA(3687bp) was isolated and used to establish the nuclear run-on-cell system, modulate the function of TRH receptor mRNA, and increase the expression rate of TRH receptor mRNA. The TRH receptor of one side, one side The physiological significance of the end of the chain is the existence of the control mechanism.

项目成果

木村 信子: "下垂体GH_3細胞TRH受容体mRNAのエストロゲンによる調節機序" 日本内分泌学会雑誌. 69. 285 (1993)

Nobuko Kimura：“雌激素介导的垂体 GH_3 细胞 TRH 受体 mRNA 的调节”日本内分泌学会杂志 69. 285 (1993)。

木村 信子: "下垂体GH_3細胞TRH受容体発現のエストロゲンによる調節機序の解析" 生化学. 65. 809 (1993)

Nobuko Kimura：“雌激素对垂体GH_3细胞TRH受体表达的调节机制分析”生物化学65. 809（1993）。

木村 信子: "Estradiol transcriptionally and posttranscriptionally up-regulates thyrotropin-releasing hormone receptor messenger ribonucleic acid in rat pituitary cell." Endocrinology. 134. 432-440 (1994)

Nobuko Kimura：“雌二醇在转录和转录后上调大鼠垂体细胞中促甲状腺素释放激素受体信使核糖核酸。”134. 432-440 (1994)