肺移植後の神経再生:移植肺内神経構築変化の定量形態学的解析

肺移植后的神经再生：移植肺内神经结构变化的定量形态学分析

• 批准号: 05807122
• 负责人: 西山 勝彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05807122/
• 关键词: カルボシアニン蛍光色素; D:I; 神経再生; 塩基性線維芽細胞増殖因子; DiI; 肺移植; 迷走神経; 疑核; NGF

カルボシアニン蛍光色素Dilをエチルアルコールに溶解して、左右の頚部迷走神経へ取り込ませる事による、脳内への逆行性の神経細胞の標識について、従前の逆行性色素に加えて、有用な点について、現在論文投稿中。さらに、胃、肺などの臓器に同様にして、色素の投与を行ったところ、その支配領域の脳内の神経細胞の標識に成功した。この点についても、論文作成中。肺移植モデル、除神経モデルについての検討は、平成7年の6月より開始。平成6年度後半より、臓器の神経再生にかかわる因子として塩基性線維芽細胞増殖因子(bFGF)に注目し、除神経臓器の内部で起こるbFGFのmRNA発現の変化をcompetitive PCR法をもちいて経時的に、定量的に把握する方法の確立を目指してきた。ラットbFGF mRNAの定量系の確立のために、A)PCRプライマーの合成;B)competitor テンプレートの作成(1)上記pTB784 plasmid DNAを制限酵素EagIとKpnIで切断の後にligation。355bpのPCRproductをうむ、組み替えテンプレートDNAを作成。(2)RAT、Mouse、Humanの3種G3PDHに共通に反応するPrimerの開発。競合PCR法のためのテンプレートDNAの作成。C)competitive PCR:組織から精製したmRNAを逆転写した後に、(3)で作成したcompetitor DNAテンプレートを適量用いて、^<32>P-CTPsとともにPCRを行う。このあとは、ゲルをエチジウムブロマイドで染色する事で、視認でおおよその濃度を検討する。bFGFの発現時期に合成bFGF;TGP-580(CS23)(武田薬品中央研究所より供与済み)を大量投与し、神経再生への影響を検討する。

The pigment Dil is dissolved in the solution, the left and right parts of the brain are confused, the inner part of the brain is retrograde, and the inner part of the brain is retrograde. In addition, the organs of the stomach, lung and other organs are also involved in the identification of the neurons in the control area. This article is in the process of writing. The research on lung transplantation and neurosurgery began in June 2007. In the second half of 2006, the development of essential fibroblast growth factor (bFGF) in the brain regeneration of the brain was highlighted. In addition, the expression of bFGF mRNA in the brain regeneration was detected by competitive PCR. A)PCR synthesis of bFGF mRNA;B) compettor synthesis of bFGF mRNA;(1) pTB784 plasmid DNA restriction enzyme EagI and KpnI cleavage. 355bp PCR product is synthesized. (2) The development of Primer for RAT, Mouse and Human G3PDH. DNA preparation by PCR method. C)Competitive PCR: tissue refinement, mRNA reverse transcription,(3) preparation of competitor DNA, proper use of PCR, <32>P-CTPs, etc. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone else. bFGF was synthesized during the development period of bFGF;TGP-580(CS23)(supplied by Takeda Pharmaceutical Research Institute) was administered in large quantities, and the effects of bFGF on nerve regeneration were discussed.