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汎用補酵素再生膜型バイオリアクターの開発とその食品成分変換への応用

通用型辅酶再生膜生物反应器的研制及其在食品配料转化中的应用

基本信息

批准号：
06650905
负责人：
宮脇長人
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06650905/
关键词：
メンブレン・バイオリアクター補酵素再生 L-アミノ酸

项目摘要

第二世代のバイオリアクターとして期待されている汎用型補酵素再生系バイオリアクターの開発とその食品成分変換への応用を目的として研究を行い、以下に示すような結果を得た。1.各種低圧逆浸透膜(日東電工NTR-7410、東レUTC-20,SSA等)について、遊離型補酵素NAD,NADP,ATPに対する阻止機能を測定した結果、UTC-20が、いずれの補酵素に対しても、イオン強度にかかわりなく、90%以上の阻止率を示すことがわかり、これを用いて小型メンブレン・バイオリアクターを試作した。2.上記3つの補酵素のうち、最も汎用性の大きいNADについて、その還元型補酵素の再生系として、種々の酵素を検討した結果、反応平衡定数、酵素比活性、基質コスト、酵素コストより、グルコース脱水素酵素が最適であることがわかった。3.上記1.によるメンブレンリアクターシステムを用いて、L-アミノ酸生産のための実用系として、アラニン脱水素酵素/グルコース脱水素酵素共役系によるNADH再生を伴うピルビン酸とアンモニアからのL-アラニンの連続生産を試みた結果、NADサイクリング数110,000、反応器生産性260g/L/day、反応転化率55%という結果を得た。このことは、本システムではNADのコストが11万分の1に、すなわち殆ど無視できるレベルまでコストダウン出来ることを意味している。4.上記の系における反応転化率の改善のため、中性領域で不安定なピルビン酸をバイオリアクター流入直前まで酸性条件に維持することによって、反応転化率を100%とすることができた。アラニン脱水素酵素がヒドロキシピルビン酸にも作用することを利用して、同じ酵素反応系によるヒドロキシピルビン酸からL-セリンへの変換を試みた結果、NADサイクリング数13,300、反応器生産性75.7g/L/day、反応転化率20%という結果を得た。

The second generation of enzyme regeneration system was developed for the purpose of changing food ingredients and obtaining the results shown below. 1. Various kinds of low pressure reverse osmosis membranes (Nitto Denko NTR-7410, Tokyu UTC-20,SSA, etc.) were tested for the inhibition function of NAD,NADP,ATP, UTC-20, UTC-20). 2. The above three items include: enzyme detection, most versatile NAD detection, regeneration system of reductive enzyme, enzyme detection results, reverse equilibrium determination, enzyme specific activity, substrate detection, enzyme detection, and enzyme dehydration. 3. 1. Test results of NADH regeneration, NAD conversion, NAD conversion. 55% of the results were obtained. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone who's been in a relationship with someone else. 4. The above mentioned system improves the degradation rate, and the neutral field is unstable. The acid flow is stable. The degradation rate is 100%. The results showed that the NAD conversion rate was 13,300, the reactor productivity was 75.7 g/L/day, and the reaction rate was 20%.