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精巣細胞外マトリックス成分の局在と性質

睾丸细胞外基质成分的定位和特性

基本信息

批准号：
06670033
负责人：
澤田元
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

精巣に存在する30kDa細胞外マトリックスタンパクが精細管の基底膜や、間質の細胞外マトリックス、マクロファージに存在することが免疫組織化学的に光学顕微鏡、電子顕微鏡レベルで判明した。またこのタンパクは精巣のSertoli細胞、筋様細胞に対し接着活性があることを示された。精巣の細胞外マトリックスの主要タンパク、ラミニン、フィブロネクチン、IV型コラーゲン、ヘパラン硫酸プロテオグリカンなどの局在を新しい免疫電子顕微鏡法であり、従来法よりも感度、分解能ともに高いnanogold法を用いて調べた結果、これまで精細管と筋様細胞の間には見られないといわれていたフィブロネクチンがこの部位に存在すること、基底板の主要成分であるIV型コラーゲンとラミニンと常に共存するわけではなく、IV型コラーゲンがラミニンの見られない筋様細胞の内側の細胞膜に接して存在し、しかも連続的ではなく、パッチ状に分布していることなどが示された。この結果を現在もう一つの信頼性の高い免疫電子顕微鏡法である凍結超薄切片法で確認している。精巣の細胞は特定の条件(回転培養など)の下で元の組織を思わせる構造に再構築されていく、新しく非接着性の基質の上で培養することで迅速に同様の再構築が起こることがわかった。この方法では24時間でSertoli細胞が内側に、筋様細胞が外側に配置した同心円上の構造を形成し、かつ一部の細胞の間には基底板様構造がすでに形成されつつあった。このシステムを用いて、様々な因子の及ぼす作用を検討している。細胞外マトリックス成分の内では抗フィブロネクチン抗体が顕著な形態形成の抑制作用を示した。ラミニン、IV型コラーゲン等に対する抗体は際だった作用は示さなかった。今後細胞内での変化についても追求していく予定である。

The presence of 30kDa extracellular matrix in the basement membrane of seminiferous tubules, extracellular matrix in stroma, and extracellular matrix in sperm was identified by immunohistochemistry using optical microscopy and electron microscopy. Sertoli cells, muscle cells, and the like are active. The main characteristics of extracellular matrix of sperm cells are as follows: type IV matrix, type IV matrix. The main component of the basal plate is the type IV protein, which is present in the inner membrane of the tendon cells. The results were confirmed by electron microscopy and frozen microsection. The cells of sperm are rapidly reconstructed under specific conditions (culture) and on new non-adherent substrates. This method takes 24 hours to form a concentric structure between Sertoli cells on the inside and muscle cells on the outside, and to form a structure between cells on the substrate. This paper discusses the application, factors and functions of the system. The inhibitory effect of extracellular components on morphogenesis was demonstrated by anti-tumor antibodies. Antibodies such as type IV and type IV antibodies have been shown to function differently. In the future, the intracellular changes will be pursued in a predetermined manner.