脳神経系の発生初期過程に関する分子遺伝学的研究

颅神经系统早期发育过程的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
06670147
负责人：
大久保博晶
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670147/
关键词：
神経前駆細胞 TEF-1 転写調節因子 TEAドメイン神経発生後脳

项目摘要

哺乳動物神経発生の初期過程に関わる遺伝子群の発現制御機構を解明する目的で、サブトラクションとdifferential hybridization法を用いて、神経前駆細胞により多く発現するcDNAクローンを選択し、その5´末端の部分塩基配列の決定と既存のデータベースに対する比較により解析した。その結果得られたcDNAの一つは、P.ChambonらがヒトのHeLa細胞から単離したSV40のエンハンサーに結合する転写因子TEF-1と、約65%の相同性を示す新たな蛋白をコードしていた。また本蛋白はヒト、マウス、ニワトリなど脊椎動物のTEF-1をはじめ、出芽酵母のトランスポゾンTy1の活性化に必要なTEC1、こうじカビ(A.nidulans)の胞子形成に関与するabaA、ショウジョウバエの感覚神経細胞の分化に関与するscalloped(Sd)等の遺伝子産物とファミリーを形成することが明らかになった。さらに、これらの蛋白に共通で、DNA結合領域と推定されるTEAドメインの一次構造、およびGT-IICモチーフに対する特異的なDNA結合活性は本蛋白においてもTEF-1同様に完全に保存されていることも証明できた。一方、ubiquitousな発現を示すTEF-1とは異なって、本mRNAの発現はマウスの胎生10日前後をピークとし、特に後脳領域に発現をみとめ、成体には殆ど発現が見られなかった。従って、本蛋白(ETF:Embryonic TEA domain-containing Factorと命名)は神経前駆細胞、とくに後脳や小脳、の発生過程に関与する転写因子である可能性が強く示唆された。マウスのTEF-1はヒトのTEF-1とアミノ酸レベルで99%の相同性を有し、mRNAの大きさや塩基配列からも我々の発見したETFとは明かに異なる。我々が発見した蛋白は、このファミリーを構成する哺乳類で2番目の蛋白であり、ニワトリTEF-1もいくつかの根拠から、マウスやヒトのTEF-1とは異なるサブタイプと考えられることから、我々は、哺乳類においてTEAドメインをもつ転写因子群に複数のサブタイプが存在し、各サブタイプはそれぞれ組織特異的あるいは時期特異的な遺伝子発現調節に関与するであろうと結論した。

为了澄清哺乳动物神经发生早期阶段涉及的基因组的表达控制机制，使用减法和差异杂交方法选择了在神经祖细胞中更表达的cDNA克隆，并通过确定5'末端的部分核苷酸序列并将其与现有数据库进行比较来分析。所得的cDNA之一编码了一种新蛋白质，该蛋白与TEF-1表现出约65％的同源性，TEF-1是一种与SV40增强子结合的转录因子，由P. Chambon等人分离。来自人类HeLa细胞。 It has also been revealed that this protein forms a family with gene products such as TEF-1 in vertebrates such as humans, mice, and chickens, TEC1, which is necessary for the activation of the transposon Ty1 in budding yeast, abaA, which is involved in the sporulation of A. nidulans, and scalloped (Sd), which is involved in the differentiation of sensory neurons in Drosophila.此外，还证明，假定为DNA结合区域的茶域的主要结构，而这些蛋白质共有的GT-IIC基序的特异性DNA结合活性在该蛋白质中完全保存在该蛋白质中，就像TEF-1一样。另一方面，与表现出无处不在的表达的TEF-1不同，这种mRNA的表达在小鼠的胚胎寿命约10天峰值上达到了峰值，在后脑区域尤其可见，在成年人中几乎没有表达。因此，强烈建议该蛋白（命名为胚胎茶域因子）是参与神经祖细胞（尤其是后脑和小脑）发育过程的转录因子。小鼠TEF-1在与人TEF-1的氨基酸水平上具有99％的同源性，并且与我们在mRNA大小和碱基序列中发现的ETF显然不同。 The protein we discovered is the second protein in mammals that constitute this family, and chicken TEF-1 is also considered to be a different subtype from mouse and human TEF-1 on several grounds, so we conclude that there are multiple subtypes in the group of transcription factors carrying the TEA domain in mammals, and that each subtype will be involved in tissue-specific or timing-specific regulation of gene expression, respectively.