コレラ菌の産生する新しい下痢原因毒素,ZOT,の精製と解析
コレラ菌の産生する新しい下痢原因毒素,ZOT,の精製と解析
霍乱弧菌新型腹泻毒素ZOT的纯化与分析
批准号：
06670290
负责人：
倉園 久生
金额：
$0.45万
依托单位：
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1994 至 1996
中文摘要
翻译
ZOTをcodeするDNA断片をpUCベクターにクローニングし、大腸菌で発現させたところ、菌の増殖が全く見られなかった。ZOTの塩基配列のうち疎水性部分は膜貫通部位と考えられるため(Koonin EV,FEBS Lett,312:3-6,1992)、大腸菌におけるZOTの強度の発現は大腸菌に対して致死的に働いたと考えられる。このため、全塩基配列のうち膜貫通部位と考えられるC末部分を削除し、N末部分のみをGlutathione S-transferase(GST)とのフュージョン蛋白として大腸菌で発現させた。このフュージョン蛋白より精製したZOTのN末部分でウサギを免疫し、ZOTのN末部分に対する特異抗体を作成した。この抗体を用いてZOTに対するビーズELISAを構築したところ、抗GST抗体をかなり含んでいることがわかった。このため、このconjugateをGSTで吸収しZOTに対する特異性を高めた。現在、この検出方法を用いて野生株からのZOTの精製を試みている。
英文摘要
ZOTをcodeするDNA断片をpUCベクターにクローニングし、大腸菌で発現させたところ、菌の増殖が全く見られなかった。ZOTの塩基配列のうち疎水性部分は膜貫通部位と考えられるため(Koonin EV,FEBS Lett,312:3-6,1992)、大腸菌におけるZOTの強度の発現は大腸菌に対して致死的に働いたと考えられる。このため、全塩基配列のうち膜貫通部位と考えられるC末部分を削除し、N末部分のみをGlutathione S-transferase(GST)とのフュージョン蛋白として大腸菌で発現させた。このフュージョン蛋白より精製したZOTのN末部分でウサギを免疫し、ZOTのN末部分に対する特異抗体を作成した。この抗体を用いてZOTに対するビーズELISAを構築したところ、抗GST抗体をかなり含んでいることがわかった。このため、このconjugateをGSTで吸収しZOTに対する特異性を高めた。現在、この検出方法を用いて野生株からのZOTの精製を試みている。
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专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Hisao Kurazono: "Distribution of genes encoding cholera toxin,zonula occludens toxin,accessory cholera toxin,and eltor hemolysin in Vibrio cholerae of diverse origins" Microbial Pathogenesis. (accepted). (1995)
Hisao Kurzono：“不同来源霍乱弧菌中编码霍乱毒素、闭塞小带毒素、辅助霍乱毒素和埃尔托溶血素的基因的分布”微生物发病机制。
Hisao Kurzono：“不同来源霍乱弧菌中编码霍乱毒素、闭塞小带毒素、辅助霍乱毒素和埃尔托溶血素的基因的分布”微生物发病机制。
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
コレラ菌(Vibrio cholerae)の産生する新しい下痢原因毒素、ZOT(toxin for zonula occludens)の精製と解析
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批准号：05770187
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$0.58万
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财政年份：1993
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负责人：倉園 久生
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依托单位：
Vero毒素産生性大腸菌の分布状況と新しいVero毒素の検出
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批准号：04770260
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$0.58万
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财政年份：1992
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负责人：倉園 久生
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依托单位：
キャンピロバクタ・ジェジュニの病原性に関する研究
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批准号：62770283
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$0.7万
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财政年份：1987
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负责人：倉園 久生
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依托单位：
海外基金
