ヒトのインスリン分泌顆粒に局在する 新しい蛋白の単離と一次構造決定に関する研究

人胰岛素分泌颗粒中新蛋白的分离及一级结构测定研究

• 批准号: 06671012
• 负责人: 伊藤 正毅
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06671012/
• 关键词: 人膵B細胞; 唾液ペプチドP-C; 免疫組織科学

膵臓と唾液腺の間には病因的、形態的、機能的な面で類似点のあることが報告されてきた。これらの報告に基ずき、申請者は人唾液腺により、単離され、一次構造の明らかにされた種々のペプチド(ペプチドP-C,P-B,P-E)や蛋白(唾液proteinC)の抗体を作製し両臓器の関係を検索してきた。これまでの研究によって人の膵臓のインスリン分泌顆粒にペプチドP-CのC-末端の7個のアミノ酸(Pro-Gln-Gly-Gln-Ser-Pro-Gln)と共通の抗原性をもつ分子量11500の蛋白が存在すること、糖尿病の剖検膵のホルマリン固定の切片に対する免疫組織学的検索でこの物質が減少していることを明らかにした。今年の研究では、1)ペプチドP-C抗体(ポリクロナール抗体)とこの膵臓にある蛋白の共通抗原部位はペプチドP-Cの7個のアミノ酸配列すべてなのか、さらに少ないアミノ酸配列で良いのか否かを調べるため、ペプチドP-Cの抗体を合成したPro-Gln-Gly-Gln-Ser-Pro,Pro-Gln-Gly-Gln-Ser,Pro-Gln-Gly-Gln,Gln-Gly-Gln-Ser-Pro-Glnで吸収した後、免疫組織学的、およびWestern blot法で検索した。その結果、両者の共通の抗原部位はGln-Ser-Pro-Glnであることが明らかになった。このことをさらに確認するためlys-Gln-Ser-Pro-Glnを合成しグルタールアルデヒドにてBSAと結合後ウサギに免疫し、抗体をBSAにて吸収したあと人膵臓を免疫組織学的に検索すると膵B-Cellが陽性に染色された。このことより両者の共通抗原部位はGln-Ser-Pro-Glnであると確認された。この抗体を使用したaffinity chromatographyによる膵抽質の単離はプロテアーゼによる抗体の破壊により成功しなかった。

The etiology, shape and function of salivary gland disease are similar to those of salivary gland interstitial disease. The antibody of protein (salivary proteinC) is used as an antibody to detect the protein (saliva proteinC) of human salivary glands, isolate, and make one-time production of the protein (saliva proteinC). The antigenicity of 7 amino acid (Pro-Gln-Gly-Gln-Ser-Pro-Gln) proteins with a molecular weight of 11500 in the C-terminal was expressed in the presence of a protein with a molecular weight of 11500. Diabetes mellitus was dissected, fixed, sectioned, fixed, fixed, In this year's study, 1) the antigens shared by the common antigens of the antigens were detected, 1) the antigens of the common antigens were detected, and the seven antigens of the seven antigens were packed with antigens, and the antigens were not synthesized by the combination of antigens, antigens, antigens and antigens. After Pro-Gln-Gly-Gln-Ser,Pro-Gln-Gly-Gln,Gln-Gly-Gln-Ser-Pro-Gln inhalation, immunology and Western blot method were used. According to the results of the test, the antigenic site of Gln-Ser-Pro-Gln antigen was common to all patients. To make sure that the lys-Gln-Ser-Pro-Gln was synthesized, the antibodies were immunized and the antibodies were absorbed by BSA after the combination of the B-Cell and the BSA. The antibodies were not detected in immunology. The antigens are common to those who share the same antigen. The Gln-Ser-Pro-Gln antigen is confirmed. "Antibody" uses "affinity chromatography", "extract", "isolate", "antibody", "successful" and "successful".

项目成果

Yamazaki.et al: "Urinary excretion rate of ceruloplasmin in non-insulin dependent patientswith diffrent stage of neihropathy" European Journal Endocrinology. in press.

Yamazaki.et al：“肾病不同阶段的非胰岛素依赖患者中铜蓝蛋白的尿排泄率”欧洲内分泌学杂志。