人のインスリン分泌顆粒に局在する新しいインスリン分泌調節蛋白の研究

位于人胰岛素分泌颗粒中的新型胰岛素分泌调节蛋白的研究

• 批准号: 01570632
• 负责人: 伊藤 正毅
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01570632/
• 关键词: 唾液ペプチドP-C; 人膵B-細胞; 糖尿病; 螢光抗体法; インスリン分泌調節

アミノ酸44個からなる唾液ペプチドP-Cのpolyclonal抗体と免疫学的に反応する物質が人膵B-細胞のインスリン分泌顆粒に存在することを見いだし報告してきた。今年の研究ではこの膵B-細胞の物質が唾液ペプチドP-Cそのものなのか(2)唾液ペプチドP-CそのものでなければP-Cのアミノ酸組成の内どの部分が共通の抗原決定部位かを検索した。さらに(3)膵B-細胞のこの物質はどのくらいの分子量なのかをも検索した。(1)と(2)のためには唾液ペプチドP-Cの抗体に、合成したP-Cフラグメントを加えて吸収し、螢光抗体法にて調べた。又、P-Cのモノクロナ-ル抗体を作製し、そのモノクロナ-ル抗体を用いた螢光抗体法により、唾液腺と膵を検索して行った。さらに唾液ペプチドP-Cの前駆体がSalidary ProteinCであることも知られているのでこのProteinCの抗体も用いて検索した。(1)と(2)の結果:Salidary ProteinCの抗体およびP-Cの中間部のモノクロナ-ル抗体により人の耳下腺のSerous cellは染色されるが人の膵B-細胞は検出されなかった。このことから膵のP-C様物質はP-Cそのものでないと考えられた。さらに吸収テストの結果、膵のP-C様物質と唾液ペプチドP-Cの共通抗原部位は唾液ペプチドP-CのC末端の7個のアミノ酸配列の中に存在することが判明した。(3)のためにヒト膵の抽出物をWesterm blotting法にて検索してみると分子量11500の蛋白であることが判明した。この物質の検出にあたって、螢光抗体法で行ったように、唾液ペプチドP-Cの合成フラグメントを用いて吸収した抗体を用いてみると、螢光抗体法の結果と一致し、膵のP-C様物質は唾液ペプチドP-CのC末端の7個のアミノ酸配列の中に共通抗原性を持つ蛋白であることが結論づけられた。以上より、人の膵B-細胞のインスリン分泌顆粒には分子量11500の蛋白が存在する。この蛋白は唾液ペプチドP-CのC末端の7個のアミノ酸配列の一部と共通抗原性を持つ物質である。

The results of 44 kinds of salivary acid, P-C polyclonal antibody and immunologic reactions, including the presence of secretory granules in human B-cells, were reported. This year's study explored the common antigenic determinants of B-cell substances in saliva (2) and P-C in saliva (3). (3) The molecular weight of B-cell substances was determined. (1)(2) The P-C antibody is synthesized by adding absorption and fluorescent antibody. In addition, the P-C antibody was produced by fluorescent antibody method, and the salivary gland antibody was detected by fluorescent antibody method. P-C precursors are used in the detection of protein-C antibodies. (1)The results of (2):Salidary ProteinC antibody and P-C antibody in the middle part of the human ear gland Serous cell staining and human B-cell staining. The P-C substance is the same as the P-C substance. As a result of absorption, it was found that the common antigen sites of P-C and saliva existed in the seven amino acid sequences at the C-terminal of P-C. (3)The protein with molecular weight of 11500 was identified by Westerm blotting. The results of fluorescent antibody method were consistent with those of fluorescent antibody method. The P-C substances were identified from saliva and the common antigenicity of the seven amino acids in the C-terminal of P-C was determined. The above results indicate that human B-cell protein secretion granules contain protein with molecular weight of 11500. This protein contains seven amino acid sequences at the P-C and C-terminal ends, and one of them has common antigenicity.

项目成果

Seiki Ito et al: "Urinary orosomucoid excretion rate and clearance in patients with non-insulin dependent diabetes mellitus" Acta Endocrinolgy. 120. 584-590 (1989)

Seiki Ito 等人：“非胰岛素依赖型糖尿病患者的尿口乳清蛋白排泄率和清除率”Acta Endocrinolgy。

Seiki Ito,Toshimitsu Suzuki et al: "Salivary peptide P-C of human pancreatic B-cells shares only partly inmunoreactivity with salivary peptide P-C indicating a new B-cell protein which is different from insulin" Acta Endocrinology. 120. 62-68 (1989)

Seiki Ito、Toshimitsu Suzuki 等人：“人胰腺 B 细胞的唾液肽 P-C 仅与唾液肽 P-C 具有部分免疫反应性，表明存在一种不同于胰岛素的新 B 细胞蛋白”Acta Endocrinology。